《中标自然基金标书3》.pdf

杰弗森SCI论文编辑部 国家自然科学基金申请书 查看报告正文撰写提纲 报告正文 （一）立项依据与研究内容 1 、项目的立项依据（附主要的参考文献目录）。 肝移植目前已成为治疗终末期肝脏疾病的有效手段，然而仍需长期应用免疫抑制剂来预防和治 疗排斥反应，这些药物不仅具有一些严重的副作用，而且可能会抑制免疫耐受的产生，使患者必终 生应用免疫抑制剂。移植物排斥反应的本质是免疫应答，探索控制移植后的排斥反应，提高移植物 的存活率，一直是移植免疫学家致力攻克的堡垒。近年来器官移植已经取得重要进展，移植前的组 织配型、供体的预处理以及移植部位的选择等手段明显减轻了移植免疫排斥反应，各种免疫制剂的 长期应用进一步控制了排斥反应。但由于无关人群中，HLA 相同的个体十分罕见，而免疫抑制目前 的方法有许多明显的副作用，慢性移植排斥也没有有效控制的方法，因此临床器官移植中抗移植排 斥的问题仍没有彻底解决。目前认为解决这些问题的关键是在于诱导受者对供体组织器官的免疫耐 受。90 年代以来，随着基因转移技术的迅速发展及基因治疗理论和实践的不断完善，使基因治疗成 为在分子水平研究移植免疫耐受的重要手段，移植中应用基因治疗有许多优越性，活体内基因转导 不仅可以产生持续的生物调控基因产物的表达，而且能在低温下进行而不影响肝脏的功能（1）。免 疫耐受是指免疫系统接触抗原后产生的特异性无应答或低应答性。Medawar （1953 年）（2 ）首先报 道了给新生鼠注射同种淋巴细胞诱导获得性移植免疫耐受性，这极大地推动了移植免疫耐受研究的 进展。近年的研究表明通过基因治疗阻断协同共刺激信号以及建立受体体内微嵌合体在诱导移植免 疫耐受方面发挥重要作用（3，4 ），然而目的基因转染载体的选择及移植供体基因修饰的最佳时间和 有效方法仍存在很大争议。在器官移植中，细胞因子构成了一个非常复杂的网络结构并发挥着相互 作用。1989 年 Fiorentio 等发现 TH2 细胞株 D10.G4.1 能分泌一种抑制 TH1 细胞功能的因子白细胞介 素-10 （interleukin-10，IL-10）。有研究表明rhIL-10 可抑制 Kupffer 细胞产生中性粒细胞特异性的化 因子（cytokine-induced neutrophil chemoattractant ，CINC ）而减少中性粒细胞的浸润和缺血再灌注损 伤的程度，延长大鼠肝移植后生存时间，夏家红发现 IL-10 参与调节移植排斥反应，其表达水平 与移植物存活时间成正相关。Deng 等应用 IL-10 和 TGF- β基因，在异种胰岛移植模型中延长了胰岛 移植物的存活时间。最近 Shinozaki （7 ）等研究也表明IL-10 能抑制大鼠肝移植后排斥反应并提高移 部 植物存活期。IL-10 是由多种细胞产生的具有多样性生物学活性的细胞因子，可降低抗原递呈细胞 MHCII 类抗原表达，IL-10 还可抑制 IL-2、IFN-r、TNF 等细胞因子的合成，并且可以降低 ICAM-1 等 辑 黏附因子的表达和维持树突状细胞的幼稚状态，从而在降低移植物排斥反应和诱导受体体内的 GM 。 编 许多研究表明 DC 表型在嵌合水平方面发挥重要作用，以往多在供体器官灌洗过程中导入目的基因， 近来研究发现病毒载体介导的目的基因表达一般 2-3 周后达到高峰，而器官移植排斥反应多发生在 文 移植术后的一周，所以治疗性目的基因的表达与排斥反应的发生往往不同步，因此选择有效的目的 论 基因转染方法和最佳的基因导入时间至关重要。DC 几乎存在于哺乳动物的所有器官中，未成熟 DC