《中空纤维测试法：高效药物活性筛选》.pdf

中空纤维测试法：抗肿瘤药物筛选 随着体外高通量筛选的进行，所获得的潜在抗肿 从 90 年代开始，美国国家癌症研究所开始使用 瘤药物数量远远超过了传统移植瘤模型所能测试 60 种肿瘤细胞系作为新型抗增殖药物体外筛选的 的容量，故而，美国国家癌症研究所（NCI）开发 基础，不久，筛选工作就开始获得了一系列抗增 了新型体内中空纤维测试模型。越来越多的中空 殖候选药物，但进行进一步的研发之前，需在体 纤维测试数据显示，药物的中空纤维测试值越高， 内实验模型内确认其活性。而传统移植瘤测试所 其在移植瘤模型测试中具有活性的可能性越高。 需的成本和时间问题，大大降低了药物的体内测 除原始的12 个中空纤维测试细胞系外，现已补充 试速度。 有更多的组织特异性肿瘤细胞系，使测试结果更 有价值。中空纤维模型的主要目的是降低药物初 为解决这个问题，NCI 研发了一种短期的体内测 步活性筛选的成本及实验动物用量。 试方法。在这种方法中，细胞生长于聚偏氟乙烯 （PVDF）中空纤维内，然后纤维植入小鼠身体的 1. 为什么使用中空纤维？ 不同部位。纤维截留分子量为 500kD ，允许小分 子物质渗过。植入体内后，待测化合物按一定的 新抗肿瘤药物的发现主要有两种方法：针对体外 时间间隔和剂量给药 4-5 天，然后从小鼠体内取 或体内细胞增殖模型的经验性筛选可获得具有一 出纤维，再对纤维内细胞进行细胞学分析，即可 定程度体内活性或可抗特定细胞系的先导结构， 初步获得化合物的体内活性数据。NCI 已使用标 然后再对其进行进一步的研发；而定向筛选则测 准活性药物对该方法进行验证，并建立了完整的 试先导结构对特定分子靶标的活性，其使用体外 计分系统。 生化筛选、细胞分析及体内组织培养模型。先导 结构在体内环境下的活性对其下一步的优化具有 使用已确认活性的化合物分别进行中空纤维测试 更为重要的指导意义。 和无胸腺小鼠移植瘤模型测试，所获得的数据基 本一致。总体上讲，使用针对植入腹膜（i.p.）和 表 1 中空纤维测试细胞系 标准 白血病/淋巴癌 黑色素瘤 前列腺癌 肾癌 乳腺癌 结肠癌 MDA-MB-231 COLO-205 HL-60 MALME-3M JCA- 1 RXF-393 MDA-MB-435 SW-620 MOLT-4 M14 DU- 145 A498 神经胶质瘤 黑色素瘤 U251 LOX-IMVI AS-283 SK-MEL-2 PC-3 CaKi- 1 SF-295 UACC-62 KD488 SK-MEL-5 卵巢癌 肺癌 OVCAR-3 NCI-H23 SR SK-MEL-28 OVCAR-5 NCI-H522 RPMI-8226 UACC-257 1 / 5 皮下（s.c.）的 12 个细胞系的计分算