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脂肪间充质干细胞复合多孔丝素材料修复尿道缺损的实验研究
脂肪间充质干细胞复合多孔丝素材料
修复尿道缺损的实验研究
中文摘要
目的:
建立兔尿道缺损模型,探索脂肪间充质干细胞复合多孔丝素材料修复尿道缺损
的可行性。
方法:
1.脂肪间充质干细胞(ADMSCs)分离、培养和纯化:
抗体。
2.应用复合ADMSCs的多子L丝素材料修复尿道缺损实验:
选取39只体重约3.O一4.5kg雄性新西兰大白兔,随机分3组进行动物实验:
多孔丝素材料组(SSF组,n=13)。常规麻醉后于尿道腹侧正中线纵行切开尿道前
壁1.5cm,切除2.5×1.0cm2尿道后壁,建立尿道缺损模型。对照组切除尿道后壁,
缝合尿道前壁,术后留置导尿3w。SF组切除尿道后壁,将多孔丝素材料用Inlay
术式修复尿道缺损后,缝合尿道前壁,术后留置导尿3w。SSF组切除尿道后壁后,
尿道前壁,术后留置导尿3w。各组动物术后导尿管每天用呋喃西林冲洗一次。术
后分批处死动物,收集手术区尿道标本行HE染色常规病理检查,免疫组织化学测
胞分布情况。所有实验动物手术前和处死前均行尿道造影检查。
主要结果:
1.ADMSCs细胞的分离、培养和纯化:
分离培养2h后,细胞开始贴壁。ADMSCs细胞3d后多呈梭形成纤维细胞样,培养
脂肪间充质干细胞复合多孔丝素材料修复尿道缺损的实验研究 中文摘要
对数增殖期,11d进入生长平台期。CD44、Vimentin呈阳性表达。
2.应用复合ADMSCs的多孔丝素材料修复尿道缺损实验:
2.1尿道造影:
所有实验动物术前逆行尿道造影显示尿道形态正常,术后终止实验前复查逆行尿
道造影观察尿道狭窄和尿瘘的发生情况。对照组术后并发症发生率为76.92%(7/13),
SSF组和SF组术后并发症发生率无显著性统计学差异(PO.05)。
2.2大体形态学观察:
肉眼观察,对照组术后2w尿道缺损区缺乏内衬黏膜,表面凹凸不平,周围尿道
黏膜充血、水肿,术后4w、6w瘢痕已经形成,黏膜收缩,管腔狭窄。SSF组和SF
组术后2w手术区丝素材料仍裸露在尿道管腔内侧表面,缺乏内衬黏膜。术后4w、6w
丝素表面覆盖黏膜,少量丝素脱落。
组织学观察:对照组术后2w尿道缺损区尿道黏膜上皮未形成,可见大量的淋巴
细胞浸润。术后4w缺损区尿道黏膜形成不连续,表面高低不平,黏膜下可见大量淋
巴细胞浸润,纤维组织增生。术后6w缺损区尿道黏膜上皮细胞层数增多,细胞排列
不规则,极性紊乱。黏膜下仍可见大量淋巴细胞浸润,纤维组织增生,组织结构紊乱,
可见散在少量平滑肌纤维。
SF组术后2w多孔丝素表面没有上皮细胞形成,在多孔丝素基底部少量血管、胶
原纤维组织生长,少量淋巴细胞浸润,丝素结构完整,未见降解。术后4w在多孔丝
素表面形成复层上皮结构,黏膜下可见血管、平滑肌、纤维组织沿着丝素孔隙生长,
丝素中部分组织生长不完全,少量淋巴细胞浸润,丝素结构完整,未见降解。术后6w
在多孔丝素表面形成3.4层上皮细胞,黏膜下可见较多血管、平滑肌、纤维组织沿着
丝素孔隙生长,少量淋巴细胞浸润,丝素结构完整,未见明显降解。
SSF组术后2w多孔丝素表面没有上皮细胞形成,在多孔丝素基底部较多的血管、
胶原纤维组织生长,少量淋巴细胞浸润,丝素结构完整,未见降解。术后4w在多孔
丝素表面形成3.4层上皮细胞,细胞排列不规则,黏膜下可见大量血管、平滑肌、纤
维组织沿着丝素孔隙生长,少量淋巴细胞浸润,丝素结构完整,未见明显降解。术后
Ⅱ
脂肪间充质干细胞复合多孔丝素材料修复尿道缺损的实验研究 中文摘要
6w在多孔丝素表面形6.7层上皮细胞,排列规则。黏膜下可见大量的血管、平滑肌、
纤维组织沿着丝素孔隙生长,少量淋巴细胞浸润,丝素被分解成小块状。
术后2、4、6w于SSF组和SF组丝素间隙和边缘可见巨噬细胞阳性表达,术后
明显减少,有统计学差异(p0.05)
与尿道相交处较多。
(p0.01);同时SSF组较SF组明显增多,有统计学差异(PO.05)。
(P0.01);同时SSF组较SF组明显增多,有统计学差异(PO.05)
尿道黏膜相似。对照组尿道黏膜与正常尿道黏膜相比,胞浆染成黄色,缺
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