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醫学免疫学实验
医学免疫学实验
第2次 凝集反应与沉淀反应
试管凝集(操作)
双向扩散(操作)、对流免疫电泳(示教)
抽血(每组一人,下次实验用)
肥达反应
原理
方法
试管号
1
2
3
4
5
6
7
生理盐水(ml)
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
1:10病人血清(ml)
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
-
菌液(H)
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
最终稀释度
1:40
1:80
1:160
1:320
1:640
1:1280
对照
摇匀,37?C,18~24h
0.5弃去
结果(下周观察)
注意:
1 血清倍比稀释时,吹吸3次,从管底吸,沿管壁吹。
2 血清稀释后,菌液要从低浓度加起
肥达反应结果(观察结果注意:勿摇;先看对照管)
- 不凝集
+ 小部分凝集,管底小量凝集,上层液体较混浊
++ 部分凝集,管底部分凝集,上层液体微混浊
+++ 大部分凝集,凝块非全部下沉于管底而是稍有铺开,上层液体澄清
++++ 完全凝集,管底有边缘不整齐的膜状凝集块,上层液体澄清透明。
沉淀反应 Precipitation Tests
Single immunodiffusion
Double immunodiffusion
Immunoelectrophoresis
Single immunodiffusion
Double immunodiffusion
双向免疫扩散法检测血清中AFP
制备琼脂板(5ml),琼脂凝固后打孔。
加样 中间孔加抗AFP抗体
1、4孔加AFP阳性对照
2、3、5、6孔加待检血清
置于湿盒,37?C 24h
抗AFP抗体
1
2
3
4
5
6
结果下周观察
学号
对流免疫电泳检测血清中AFP
1、3孔加抗AFP抗体
2孔,AFP阳性对照血清
4孔,待检血清
pH 8.6巴比妥缓冲液
1
2
3
4
+
-
第2次 凝集反应与沉淀反应
试管凝集(操作)
双向扩散(操作)、对流免疫电泳(示教)
抽血(每组一人,下次实验用)
Macroscopic agglutination of latex(乳胶颗粒) coated with human IgG serum from a patient with rheumatoid arthritis.
类风湿因子的检测
RPR是心脂质(而不是密螺旋体的)梅毒抗体试验,在疾病初期呈阳性。将病人血清与炭联心脂质抗原试剂混合,阳性血清显示凝集抗原颗粒。(4分钟后观察颗粒凝集)
梅毒快速血清反应素RPR试验
检测抗原:尿液HCG的胶乳凝集妊娠试验
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