动物细胞核的分离与鉴定选编.ppt

动物细胞核的分离与鉴定;1956年由Chauveau等人提出，用高密度介质来分离细胞核，由于细胞核密度较大，在高密度介质中，在高速离心的条件下沉降下来，从而达到细胞核与细胞质的分离。;本次实验就是各种细胞器在一定介质中沉降速度的差异，用离心的方法将细胞核分离出来;用柠檬酸分离细胞核，在柠檬酸介质中可以显著除去附着在细胞核膜上的细胞质成分，由于柠檬酸降低了溶质的pH，这样可减少细胞核的破碎率。;解剖器材1套 高速捣碎机/组织匀浆器1台 普通离心机1台 天平1台 普通光学显微镜1台;1.实验前24小时小动物须保持空腹，然后将其断头处死，取出肝脏，在生理盐水充分洗去血污，用滤纸洗吸取表面液体，肝脏保存待用。;3.把捣碎液用8层纱布（先用少量生理盐水润洗纱布）过滤，绿叶以800ymp/min离心15分钟，弃上清液，沉淀再用1.5%柠檬酸钠液洗一次。;5.取上???液制成涂片①，沉淀制成涂片②，自然干燥后分别滴加甲苯胺蓝染液，染色5~7分钟。;取动物肝脏洗涤待用;组织块必须完全捣碎，过滤必须将没有捣碎的沉渣滤渣，操作必须严格按照实验步骤进行。