2无菌检查法.doc

文件名称：文件编号管理规程文件编号：SMP—PMP 001 01第  PAGE \* MERGEFORMAT 2 页 共  NUMPAGES \* MERGEFORMAT 7 页 文件名称：无菌检查法文件编号：SOP-QC255-00第  PAGE \* MERGEFORMAT 10 页 共  NUMPAGES \* MERGEFORMAT 10 页 陕西德福康制药有限公司 文件名称：标准操作程序—检验方法操作规程 无菌检查法文件编号： SOP-QC255-00第  PAGE 1 页 共  NUMPAGES 10 页批准人日期QA审核日期审核人日期执行日期分发号起草人日期颁发部门质量保证部分发部门质量控制部 1. 目的 建立无菌检查法检验标准操作规程，规范??作。 2. 范围 适用于无菌检查法。 3. 依据 《中华人民共和国药典》2010 年版二部附录P103-107。 4. 职责 4.1 起草：QC 审核：QA 批准人：质量负责人 4.2 QC 实施本规程。 4.3 QA 监督本规程的实施。 5. 内容 5.1 概述 5.1.1 无菌检查法系用于检查药典要求无菌的药品、医疗器具、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。若供试品符合无菌检查法的规定，仅表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染。 5.1.2 无菌检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内或隔离系统中进行，其全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。单向流空气区、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。隔离系统按相关的要求进行验证，其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。日常检验还需对试验环境进行监控。 5.1.3 无菌检查人员必须具备微生物专业知识，并经过无菌技术的培训。 5.2 仪器、设备和用具 5.2.1 无菌室分无菌操作间和缓冲间，在缓冲间内应有洗脸手盆、毛巾、无菌衣放置架或钩、拖鞋等，无菌室应具有空气除菌过滤的层装置，局部洁净度100级或放置同等级别的超净工作台，室温（18±26℃）及除湿装置，缓冲间及操作室内均设置能达到空气消毒的紫外光灯及照明灯，操作室或工作台应保持空气正压。 5.2.1.1 无菌室应每周和每次操作前用0.1%新洁尔灭或2%甲酚酞擦试操作台及可能污染的死角，开动无菌空气过滤器及紫外灯杀菌1小时，在每次操作完毕，同样用2%甲酚酞或0.1%新洁尔灭擦试工作台面，除去室内湿气，用紫外灯杀菌半小时。 5.2.1.2 无菌室的无菌程度检查，无菌室在消毒处理后，无菌试验前及操作过程中需检查空气中菌落数取直径90mm双碟，在接种室内点燃酒精灯，在酒精灯旁，以无菌操作，将双碟半开注入溶化的营养琼脂培养基约15ml，制浅平板，在35-37℃预培48小时，证明无菌后将平板3个，以无菌方式带入无菌操作间的洁净区左、中、右各放一个，打开碟盖和置平板在空气中暴露30分钟后，将碟盖盖好，置35-37℃培养48小时，取出检查，3个平板上生长的菌落数相加总数不得过10个。 5.2.1.3 无菌操作台面或超净工作台，应定期检测其洁净度，应达到100级尘埃粒子＜5um的粒数不得超过3.5/升；空气流量应控制在0.75-1.0m3/s，细菌菌落数平均＜1个，可根据无菌状况定期置换过滤器。 5.2.1.4 无菌室内应准备好盛有消毒用5%甲酚酞的玻璃罐，酒精灯，火柴，镊子75%酒精棉球，碘精棉及拖鞋等。 5.2.2 真空泵极限压力6×10-2Pa，抽数1L/S，转速1400r/min,功率为0.25KW。置无菌室外，以耐压橡皮管通入无菌操作室。 5.2.3 恒温培养箱及可调的30-35℃生化培养箱。 5.2.4 离心机，显微镜、高压灭菌炉、恒温烤箱。 5.2.5 玻璃器皿，试管移液管，刻度吸管（1.5ml、10ml）、注射器（2.5ml、10ml）双碟等，用玻璃洗涤剂或清洁液浸泡，水洗3次，使用过后如与细菌接触，应先灭菌后倒出内容物，再清洗、晾干，凡无菌操作过程中所用的器皿都应用牛皮纸包扎严密121℃灭菌30分钟。 5.2.5.1 移液管，刻度吸管在管口上端，松松塞上少许棉花，然后放入吸管简内或牛皮纸袋内，消毒备用。 5.2.5.2 试管、离心管、三角瓶等在管（瓶）口塞上角棉胶专用塞或纱布棉塞，塞子应塞进管口内2/3处，用牛皮纸将管口包扎严，消毒备用。 5.2.5.3 注射器、