3-3-2 实训 培养基灵敏度试验.ppt

实训 培养基灵敏度的测定技术; （一）实训目的 掌握培养基灵敏度试验的操作方法及培养基灵敏度检查结果的判断。; （二）材料和用具 1ml无菌刻度吸管、l0ml无菌刻度吸管、需氧及厌氧培养基、真菌培养基、试管、培养皿、0.9％无菌生理盐水、酒精灯、培养箱、试管架、吸耳球、涂布棒等。;（三）操作步骤 1.菌悬液制备 取己配制好的细菌和真菌的原菌液1m1分别加到无菌试管内，加9ml0.9％的无菌生理盐水作10倍稀释，作上标记1(10-1)，作为1号管；从1号管内各吸取1ml分别加入一个无菌试管内，加9ml无菌生理盐水，作上标记2(10-2)；重复上述操作，作10倍系列稀释，直至稀释到10-7，制成约含10～100个菌的稀释菌液。 2.涂菌平板制备 取已稀释至10-7的细菌稀释菌液各lml分别涂布在已制好的细菌培养基平板表面，做3个平板。然后倒置培养；取已稀释至10-7的真菌稀释菌液各1m1分别涂布在已制好的真菌培养基平板表面，做3个平板，倒置培养。 ;3.液体培养基接菌 取10-7的细菌稀释菌液1ml，接种至每管装有9ml需气、厌气菌培养基的试管内，平行做3管； 取10-7的真菌稀释菌液1ml，接种至每管装有9ml真菌培养基的试管内，平行做3管； 以未接菌的细菌培养基和真菌培养基管做阴性对照。 4.培养条件 需气、厌气菌30-35℃培养3天，真菌23-28℃培养5天。 ;5.结果观察及判定 观察培养结果，判定培养基是否灵敏度合格。 6.注意事项 试验用的菌悬液在制备时要注意挑取的菌落不要过多，过多会使菌悬液过浓，导致计数不准确；各个稀释剂要分别用不同的刻度吸管来吸取，在做平板菌落计数时要将菌悬液滩布均匀；平板要倒置培养；要做到以未接菌的培养基做阴性对照。 ;（四）实训结果 依据实训操作写出实训报告。 （五）思考题 培养基灵敏度试验在药品的无菌检查中起到什么样的作用？ 培养基灵敏度检查结果是如何判断的？