响应面法优化灵芝药性固体发酵培养基.PDF

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１０，３０（９）：７５７９ 响应面法优化灵芝药性固体发酵培养基 １ １ １ １ ２ 朱　强 　夏艳秋 　董克克 　杨从发 　汪志君 （１淮海工学院海洋学院　连云港　２２２００５　２扬州大学食品科学与工程学院　扬州　２２５００１） 摘要　采用单因素试验和响应曲面试验优化灵芝药性固体发酵培养基。优化所得培养基组成 为：以啤酒糟为基质，料水比１∶１．４，黄芪１２．５２％，葡萄糖４．７８％，ＫＨＰＯ０．２１％，ＭｇＳＯ ·７ＨＯ ２ ４ ４ ２ ０．２５％，Ｖ 微量。在此优化条件下，灵芪菌质多糖含量高达８．４２ｍｇ／ｇ，较优化前提高了２９．５４％。 Ｂ１ 关键词　灵芝　黄芪　灵芪菌质多糖　固体发酵　啤酒糟 中图分类号　Ｑ８１５ 　　利用药用真菌作为发酵菌种，添加了中药的药性 １．２　培养基 基质作为培养基，构建生物转化体系，不仅可对中药中 １．２．１　斜面培养基　综合ＰＤＡ琼脂培养基。 的纤维、糖类、蛋白质等加以利用，还可对中药中的某 １．２．２　液体种子培养基（ｇ／Ｌ）　葡萄糖３０，酵母膏２， 些药性成分进行修饰和转化，同时中药中的某些成分 麸皮５，ＫＨＰＯ１．５，ＭｇＳＯ ·７ＨＯ０．７５，Ｖ 微量，ｐＨ ２ ４ ４ ２ Ｂ１ 还可促进或抑制真菌代谢产物的合成与分泌，生产出 自然。 ［１５］ 包含多种活性成分的制剂或新药材 ，这是中药二次 １．２．３　固体发酵基础培养基　以啤酒糟为基质，料水比 开发及创制真菌类新药材的一种有效途径，比起普通 １∶１．４，葡萄糖 ２．５％，ＫＨＰＯ ０．３７５％，ＭｇＳＯ ·７ＨＯ ２ ４ ４ ２ ［６］ 固体发酵的菌质，可能有增效、扩用、解毒等作用 。 ０．２５％。 　　灵芝和黄芪均具有提高机体免疫和抗肿瘤等多种 １．２．４　药性固体发酵培养基　按实验设计，于固体发 ［７８］ 生物活性功能 。若将二者在适宜的条件下构建生 酵培养基中添加适量黄芪。 物转化体系，进行组合发酵，生产灵芪菌质及其次级代 １．３　方　法 谢产物灵芪菌质多糖（ＧａｎｏｄｅｔｍａｌｕｃｉｄｕｍＡｓｔｒａｇａｌｕｓ １．３．１　固体发酵工艺流程　菌种活化 液体种子培 → ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＧＡＰＳ），在人及动物新药 养 培养基配制，装入２５０ｍｌ罐头瓶，八层纱布封口， → 开发及应用上极具经济价值和社会价值。鉴于此，在 １２１℃灭菌４０ｍｉｎ 接种１０ｍｌ／１００ｇ ２８℃，避光培养待