加减抵当汤对胰岛素抵抗大鼠肝脏胰岛素受体基因表达影响.doc

加减抵当汤对胰岛素抵抗大鼠肝脏胰岛素受体基因表达影响 　【摘要】 　　［目的］探讨加减抵当汤对IR大鼠肝脏InRmRNA表达的影响。［方法］造模大鼠随机分成正常组、模型组、加减抵当汤高、中、低剂量组、文迪雅组，用RTPCR方法检测加减抵当汤对IR大鼠肝脏InRmRNA表达的影响。［结果］加减抵当汤高、中剂量组能明显上调IR大鼠肝脏InRmRNA的表达（Plt;005或Plt;001）。［结论］加减抵当汤能上调InRmRNA的表达，可能是其改善IR的机理之一。 【关键词】 抵当汤 胰岛素抵抗 胰岛素受体 基因表达 　　Abstract:［Objective］ To explore the effect of modified Didang decoction on insulin receptor gene expression in liver in insulin resistance rats.［Methods］ The insulin resistance rats were randomly divided into the control group, the model control group, the high, medium and low dosage of modified Didang decoction groups and Wendiya group.Reverse transcriptase polymerase chain reaction was used to observe the effect of modified Didang decoction on the InRmRNA of liver in rats. ［Results］ The InR gene expression level was significantly higher in the high and medium dose of modified Didang decoction（Plt;005 or Plt;001）.［Conclusion］ Upregulation on InR gene expression is possibly one of the mechanisms of modified Didang decoction in treating insulin resistance. 　　Key words： Didang decoction; insulin resistance; insulin receptor; gene expression 　　胰岛素抵抗（Insulin Resistance, IR）是胰岛素作用的靶器官、组织对胰岛素的生物学效应反应降低或丧失而产生的一系列病理和临床表现。本实验通过选用高脂高糖饲料复制IR大鼠模型，用加减抵当汤进行干预，并用西药文迪雅进行对照，观察其相关指标的变化，并从分子水平检测胰岛素受体基因在肝脏中表达的变化，为临床防治IR并阐明其作用机理提供客观依据。 　　1 材料与方法 　　11 实验动物及分组 健康雄性SD大鼠60只，体重：20880±729g，购自中国科学院上海实验动物中心，由浙江中医药大学动物实验研究中心饲养及管理。60只雄性SD大鼠先适应性饲养1周，再随机分为6组，即正常组10只、模型组10只、加减抵当汤治疗大剂量组10只、中剂量组10只、小剂量组10只、文迪雅对照组10只。正常组给予常规饲料，模型组和中药治疗组给予高脂高糖饮食，各组分别自由饮水。 　　12 饲料 基础饲料由浙江省医学科学院提供；高脂高糖饲料由浙江省医学科学院配制，其中基础饲料50%、熟猪油10%、蔗糖25%、蛋黄粉15%。 　　13 主要试剂及仪器 葡萄糖试剂盒，甘油三酯试剂盒，胆固醇试剂盒，高密度脂蛋白试剂盒，购自上海申能德赛诊断技术有限公司；低密度脂蛋白试剂盒，购自上海复星长征医学科学有限公司；胰岛素放射免疫分析药盒购自天津九鼎医学生物工程有限公司；RNA抽提试剂盒购自Promega公司；RTPCR试剂盒购自TAKARA公司；全自动血液流变仪，LBY/Nb北京普利生集团产品；低温冰箱：BCD216E/B型，青岛海尔电器有限公司产品；凝胶成像分析系统，上海天能科技有限公司产品。PCR循环仪：T personal型， Biometra公司产品。 　　14 药物 加减抵当汤组成：酒制大黄9g,桃仁9g,水蛭6g,黄芪20g；以上各药购自浙江中医药大学附属第一医院，按比例称取后，水煎后浓缩制成每毫升煎液含生药3 g，高温消毒灭菌，置于4℃冰箱保存备用。文迪雅：购自浙江中医药大学附属第一医院，粉碎后溶于09%的生理盐水。 　　15