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大刺鳅性腺发育组织学研究 　　摘 要：该文应用解剖观测和组织学的方法研究了大刺鳅的性腺发育特征。结果表明：大刺鳅生殖细胞划分为5个时相，卵巢和精巢发育划分为Ⅰ～Ⅵ期。雌鱼群体的GSI值变幅为1.05%～7.21%，属于多次分批产卵类型，繁殖高峰期为5月；雄鱼群体GSI值波动在0.09%～0.39%，与雌鱼发育同步。产卵和排精后，卵巢和精巢都恢复到Ⅱ期进行越冬，次年3月份重新发育至性成熟。 　　关键词：大刺鳅；精巢；卵巢；组织学 　　中图分类号 S917.4 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2016）10-0114-03 　　大刺鳅（Mastacembelue armatus）在分类上隶属于鲈形目（Perciformes）、刺鳅科（Mastacembelidae）刺鳅属（Mastaceblus Scopoli），俗称辣锥、猪母锯、石锥等，主要分布在我国的长江、珠江等水系，以广东、广西、福建等地江河中的野生资源较为丰富[1]。其肉质细嫩、味道鲜美、蛋白质含量高，深受消费者的喜爱。近年来，学者们已经对大刺鳅的生物学特性、消化系统、驯养生殖、肌肉分析等都进行了研究[2-9]，但对大刺鳅性腺发育的研究尚无全面深入的报道。为此，笔者采用组织学方法研究了大刺鳅卵巢和精巢发育的特点，旨在为大刺鳅的资源保护、增殖、人工繁殖技术等提供科学依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验材料 本研究于2012年1～12月在肇庆市水产科学研究所进行。大刺鳅为经驯养的野生个体，每批随机抽取大刺鳅5～10尾。共组织切片40批，取大刺鳅223尾，其中雌性个体128尾，雄性个体95尾，平均体重47.6g/尾。 　　1.2 研究方法 首先解剖观测大刺鳅性腺发育情况，测量性腺重量和净体重；并对第Ⅳ～Ⅴ期雌鱼统计绝对怀卵量。测量后迅速取性腺前、中、后段放入Bouin氏液中固定，经系列酒精脱水后进行石蜡包埋、切片、H.E染色、固封，最后在光学显微镜下观察和对各时相细胞拍照。性腺和生殖细胞的发育分析参考楼允东[10]的分期标准，将大刺鳅性腺发育分为Ⅰ～Ⅵ期。相关计算公式如下： 　　绝对怀卵量=取样中的卵粒数/取样重量（g）×卵巢重（g）； 　　性腺成熟系数（GSI）=性腺重（g）/鱼体重（g）×100。 　　2 结果与分析 　　2.1 卵巢发育 雌性大刺鳅的卵巢是一对延长的囊状结构，前端分离，位于鳔腹壁两侧、肝胰脏背方，左右对称，后段末端汇合成一短的呈“Y”字型输卵管通泄殖孔，外有极薄的腹膜包裹，它们通过卵巢系膜与体腔壁层相连。成熟时的绝对怀卵量在1 386～4 175粒。 　　2.1.1 第Ⅰ期卵巢 出现在当年生幼体，卵巢呈透明细丝状，浅灰色，外观上难以分辨雌雄。切片观察卵巢，生殖上皮具增殖分生而成的密集的卵原细胞，大小不一，形态不规则，有梨形、椭圆形等，卵径为32.5～45.0μm，部分卵原细胞成束排列，胞质透亮着色浅，细胞核较大，核径为19.0～20.5μm，其中有染色深的核仁1～2个。 　　2.1.2 第Ⅱ期卵巢 卵巢呈棒状，半透明，浅黄色。肉眼尚不能看清卵粒，生殖上皮及结缔组织突入卵巢腔形成产卵板，以第Ⅱ时相卵母细胞为主，也有少量卵原细胞。卵母细胞排列紧密，形态不一，卵径为48.0～317.5μm，核径为19.5～95.0μm。有核仁22～36个，靠近核膜内侧分布。在细胞中出现卵黄核，细胞质呈强嗜碱性，被苏木精深染成紫蓝色，胞质外周出现一层滤泡细胞。胞核与胞质间形成一透明层，透明层内物质密度稀少，显得透亮，厚度为9.0～13.0μm，随着细胞继续发育，透明层变薄渐消失。 　　2.1.3 第Ⅲ期卵巢 卵巢呈黄色，卵巢外膜上的血管明显且呈分支状，透过卵巢膜可见到卵粒，但不易分离脱落。卵巢组织中以第Ⅲ时相卵母细胞为主，但第Ⅱ时相的卵母细胞也较多。Ⅲ时相卵母细胞大多近圆形或椭圆形，卵径为310.0～577.0μm，核近球形，核膜凹凸不平，核径为96.0～120.0μm，核仁11～19个。细胞中，靠近质膜的胞质外周出现2～6层直径为10.0～19.5μm小液泡。后期胞质的皮质部分出现一些被H.E染成紫红色的卵黄颗粒。 　　2.1.4 第Ⅳ期卵巢 卵巢呈亮黄色半透明，体积明显增大，卵巢外膜的血管发达，粗大且分支，呈深红色。卵巢壁薄，卵粒饱满，易分离脱落，此时用力挤压鱼腹部可挤出未成熟卵母细胞。以第Ⅳ时相卵母细胞为主，亦有较多的第Ⅱ、第Ⅲ时相卵母细胞。Ⅳ时相卵母细胞大多近圆形，卵径达862.5～1 350.0μm，核径为114.0～150.0μm。卵母细胞进入卵黄积累的大生长期，卵黄颗粒充满细胞质，体积显著增大，直径为12.5～25.0μm。核极化，出现放射带，并增厚达42.0～45.0μm，条纹清晰。 　　2.1.5 第Ⅴ期卵