药物分析 第二章 药物的鉴别试验.ppt

第二章 药物的鉴别试验 药物分析教研室 薄层色谱法具有专属性强、操作简便、实验成本低等优点。 在鉴别试验中，薄层色谱法是色谱法中应用最广的一种方法。 通过Rf值，斑点颜色进行定性。 （一）薄层色谱鉴别法 （二）HPLC、GC鉴别法 供试品和对照品 色谱峰保留时间一致。 在鉴别试验中，通常含量测定同时用于鉴别的一种方法。 色谱谱鉴别法小结 适用于复杂环境下药物有效成分及杂质鉴别,具有分离、分析同时进行的特点. 高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC) ——供试品和对照品色谱峰保留时间一致. 薄层扫描法(TLC)——对照品比较法，供试品斑点与对照品的Rf值及斑点的颜色应一致. 色谱法（ HPLC GC TLC) 四、显微鉴别法 主要用于中药及其制剂的鉴别，通常采用显微镜对药材的切片、粉末、解离组织或表面制片，以及含饮片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的一种方法。 显微鉴别法 五、生物学法 利用药效学和分子生物学等有关技术来鉴定药物品质的一种方法，主要用于抗生素、生化药物以及中药的鉴别。通常分为生物效应鉴别法和基因鉴别法两大类 按对象目的不同可分为：免疫鉴别法、细胞生物学鉴别法、生物效价鉴别法、纯指标鉴别法、DNA遗传标记法，mRNA差异显示鉴别法 中药指纹图谱：目的是通过对所得到的能够体现中药整体特性的图谱识别，提供一种能够比较全面的控制中药质量的方法，从化学物质基础的角度保证中药制剂的稳定和可靠。 特征图谱：指主要有效成分的特征峰谱图，而指纹图谱除了主要有效成分的特征峰外，还包括更多内容，更具专一性。 六、指纹图谱与特征图谱鉴别法 第三节 鉴别试验的条件及方法验证 一、溶液的浓度 溶液的浓度主要指被鉴别物质的浓度，其大小影响结果的判断。 （如化学法中要观察沉淀、颜色；UV法中λmax, A, E1%1cm) 二、溶液的温度 温度过高可使产物分解，导致颜色变浅，沉淀溶解，甚至观察 不到结果，故试验中应注意温度的控制。 三、溶液的酸碱度 许多鉴别反应都需要在一定酸碱度的条件下进行，溶液的酸碱度能够使各反应物有足够的浓度处于活化状态、使反应产物处于稳定和易于观察状态。 四、试验时间 有机化合物的化学反应较慢，需要一定的反应时间和条件。 五、鉴别方法的验证 专属性: 是指其他成分（其他药物成分、杂质、降解产物、辅料等）存在的情况的下，采用的鉴别方法也能正确地鉴别出被测物质的特性。 每种鉴别方法都存在一定的局限性，一般至少采用两种以上不同类型的方法，如化学法和光谱法。 耐用性：测定条件发生小的变化时，不影响测定结果。 （一）鉴别方法选择的原则： ① 方法要有一定的专属性、灵敏性，便于推广。 ② 采用一组试验项目全面评价一个药物，应既有母核反应，又有官能团反应，既包括化学方法，又包括仪器方法，每种药品一般选用2-4种方法进行鉴别试验，互相取长补短，力求使结论正确无误。 ③尽可能采取药典中收载的方法。 鉴别试验要求 小结 药物的鉴别试验（identification test) 是根据药物的分子结构、理化性质,采用化学、物理 化学或生物学方法来证明已知药物的真伪。 而不是对未知物进行定性分析。 是药检工作的首要任务，杂质检查、含量测定的前提。 小 结 一般鉴别试验 —依据某一类药物的化学结构或理化特性，通过化学反应来鉴别药物的真伪。 有机氟化物类、有机酸盐（水杨酸、酒石酸盐） 芳香伯胺类、托烷生物碱类、无机金属盐、无机酸根 性状：外观、溶解度、物理常数 专属鉴别试验 —在一般鉴别试验的基础上，区别同类药物的各个单体 鉴别试验的项目 小 结 化学鉴别法 仪器鉴别法 鉴别试验方法 呈色反应 沉淀生成反应 荧光反应 气体生成反应 光谱法（UV、IR、NIRS、AAS、NMR） 色谱法（TLC、HPLC、GC） X射线粉末衍射、MS 小 结 溶液浓度 溶液温度 溶液酸碱度 试验时间 干扰成分 鉴别试验条件 2、红外分析法 IR光谱法是有机药物分子的振动-转动光谱，能反映药物分子的 结构特点，分子中每个基团一般都由相应的吸收峰，且特征性强，（除光学异构体及长链烷烃同系物外）几乎没有两种化合物具有完全相同的红外吸收光谱，即红外吸收光谱具有“指纹性” ，被广泛地应用于化合物的鉴别。 2、红外分析法 IR光谱法是有机药物分子的振动-转动光谱，能反映药物分子的 结构特点，分子中每个基团一般都由相应的吸收峰，且特征性强，（除光学异构体及长链烷烃同系物外）几乎没有两种化合物具有完全相同的红外吸收光谱，即红外吸收光谱具有