鸭胚成纤维细胞的分离培养.ppt

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实验一 鸭胚成纤维细胞的分离培养 一、实验目的 了解细胞培养的准备工作 掌握原代细胞的分离培养基本技能 二、实验原理: 应用相关蛋白酶离散组织细胞,按细胞体外生长所需环境进行培养 三、实验用品 实验用液:0.25%胰蛋白酶、DMEM培养液、 PBS(-) 实验器材:CO2培养箱、超净工作台、倒置显 微镜、水浴锅、低速离心机、烧 杯、漏斗、眼科剪/镊、刻度 (无)吸管、纱布 动物取材:9-11日龄鸭胚 四、实验步骤: 取出鸭胚,PBS清洗2遍 去除鸭胚头、尾、四肢、内脏,剩下部分清洗2遍 在青霉素瓶中剪碎,PBS清洗2遍 加预热的胰蛋白酶消化8-10min 弃胰蛋白酶,加3-5ml培养液,用滴管轻吹打数次 用四层纱布过滤,制作细胞悬液 细胞粗略记数,接种培养瓶 五、实验预期结果 48h后观察细胞生 长情况、细胞形态 并细胞拍照 六、注意事项 整个过程无菌操作 组织的消化时间不能太长 细胞吹打要轻柔 接种密度要合适 七、完成实验报告 1、格式要求 2、同组间实验结果可相同,但分析讨 论不同 八、教师的操作示范

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