《Pclamp10_软件的使用》-公开课件(设计).ppt

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模拟与数字输出都可以输出串刺激。其可以是方波脉冲,锯齿脉冲,双向脉冲或者是正弦波。此串刺激在Digital bit pattern行中使用数字0,1表示,而且每一个独立的数位都可以是使用*标志来输出串刺激。 如果此种epoch的设置还不能满足你的需求,此外通过Stimulus File选项你就可以通过读取ABF或ATF文件将其中的波形输出作为analog waveform。 当你在构建command waveform时,你可以通过点击位于Protocol Editor右下方的Update Preview按钮来随时查看波形的形状。这一操作将打开一个Analysis 窗口用来显示这一波形。当你在Epoch description表格中更改设置时此窗口可以处于打开状态,并且再次点击Update Preview按钮就可以刷新其中的内容。 stimulus Pre-sweep Trains(sweep前串刺激) 在主刺激波形输出之前可以用一串串刺激来预处理细胞。这一功能在Protocol Editor的Stimulus标签中设置。 Clampex的pre-sweep train输出的模拟脉冲包含往复的基线与步阶刺激。当pre-sweep train完成后,输出可维持在post-train水平一定时间。如果串刺激的脉冲数设为零,那么就只会输出一定时间的post-train电位,这是一种方便的方法可以用来在每一sweep之前的一段特定的时间内改变holding level水平。 pre-sweep train 可以同刺激波形在同一模拟通道输出,也可在其他的模拟通道输出。在输出pre-sweep train时是不会采集数据的,所以在Clampex中你是不能记录到它所引起的反应的。如果想要观察这些效应,你需要同时在gap-free模式下运行AxoScope(使用MiniDigi数字转换器)。 P/N Leak Subtraction(P/N漏减) 漏减功能是在电压钳实验中一类矫正细胞被动膜电流的常用技术,例如,漏电流的补偿。 在P/N漏减过程中,系统会输出一系列较小幅度的方波,然后测量这些方波所诱发的反应并将它们进行加和,而后再在所记录的数据的过程中减去加和的结果就可得到漏减之后的波形了。较小的方波命令是为了防止细胞产生主动电流。这些域下波形的数目在Number of subsweeps中设置,这一数字也就是P/N漏减中“N”的含义。这里给出的波形就是按照1/N的比例缩小,细胞接受这样的刺激N次。由于漏电流的大小与刺激大小成线性关系,所以这样每一次反应大小的加和就会和真正给出刺激所引起的被动反应相同。当给出实际的命令波形时,输入的信号减去这一加和的反应就可以得到校正后的波形了。 为了避免产生主动电流反应的可能,这些P/N刺激波形的极性可以反向的。在这一情况下P/N加和反应的结果直接和输入的sweep相加就可以了。此外,为了避免这些刺激可能对细胞的不良影响,也可以在主刺激波形之后给出这些P/N漏减的波形。 在Clampex 10中,原始的数据和P/N漏减校正后的数据都会保存下来。但在采集时,只有会显示其中之一。 Real Time Controls(实时控制) 在Real Time Controls面板中你可以监视实验进行的进度,此外你还可以在数据采集过程中使用它来改变一些输入输出的参数。 这些设置包括: 改变细胞钳制电位 控制连接到灌流系统的数字输出 调整采样率 为当前选定的signal使用滤波 此外面板中还会显示出你当前的实验进度,这通过实验已用时间,处在第几条sweep和run来表示。此外面板中还会显示出你是否使用了conditioning train或P/N漏减。 使用View Real Time Controls菜单项使系统显示出Real Time Controls面板。在默认条件下,此面板会纵向显示在主窗口的左侧。你可以以拖拽一个标准对话框的方式来改变其位置,这时它就会成为一个悬浮窗口。 Junction Potential Calculator(液接电位运算器) 当溶液改变时会产生液接电位,Junction Potential Calculator可以准确的测量与确定这一电位。使用Tools Junction Potential命令来启动此工具。 你可以定义实验的类型,温度,还有所使用地线的类型等。 Junction Potential Calculator会以图示的形式显示出液接电位的多种元素。为了决定新的液接电位,在new solution中输入各种离子的浓度。然后Junction Potential Calculator就会计算出这一溶液所产生的液接电位。你可以使用ion library list来选择各离子,或

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