【临床血液学-实验课课件】_11实验十一 TT,3P,DD.ppt

TT3PD-Dimer 凝血酶 因子ⅩⅢa 非交联 交联 纤维蛋白原 纤维蛋白 纤维蛋白 纤溶酶 纤溶酶 纤溶酶 凝血酶时间测定Thrombin Time TT 凝血机制 内源 外源 Ⅻ Ⅲ Ⅻa Ⅺ Ⅺa Ⅸ Ⅸa Ⅸa, Ca2+,Ⅷa Ⅶa,Ca2+,Ⅲ PF3 PF3 Ⅹa Ⅹ Ⅹa,Ca2+,Ⅴa PF3 Ⅱ Ⅱa Ⅰ Ⅰa (纤维蛋白) 操作 1.枸橼酸钠1：9抗凝血2ml 2.3000rpm离心15min 3.将血浆150ul加入试管内37℃温浴1min 4.加入150ulTT试剂，同时启动秒表 5.不断轻轻倾斜试管，记录凝固时间，重复2次取均值报告 参考值 （16-18）S 超过正常对照3S为延长 临床意义 延长：见于DIC时Fg消耗，异常Fg血症或先天性低（无）Fg血症; 原发性纤溶，FDP增高; 肝素和类肝素物质增多。 缩短：少见 可作为链激酶、尿激酶溶栓治疗时的监测指标，正常的3-5倍 注意事项 ⑴抗凝比例要准确，±不得超过0.2ml ⑵离心速度及时间必须到位，以除去血小板的干扰 ⑶采血后2小时内完成 ⑷标本不得有溶血、凝血 ⑸标本结果异常应密切联系临床 ⑹凝血酶试剂易失活，4℃可保存3天 3P试验 血浆硫酸鱼精蛋白副凝固实验 操作:取血浆和(阳性对照血浆)各0.5 ml ,分别加入0.05ml 1%的硫酸鱼精蛋白溶液,放37oC 30min ,观察有无絮状沉淀物. 阳性:絮状沉淀物或细蛋白网 意义:纤溶的筛选,但假阳性和假阴性较多,已被D-D取代. 血浆D-二聚体检测 主要检测方法： 1. 胶乳凝集法 2. ELISA法 3. 免疫比浊法 胶乳凝集法 原理： D-二聚体+ D-二聚体单抗（胶乳颗粒） 结果： 正常：阴性 血浆D-二聚体0.5mg/L时阳性 操作 1. 枸橼酸钠1：9抗凝血2ml 2. 3000rpm离心15min 3. 取20ul D-D胶乳试剂+20ul血浆混匀，同时开启秒表 ，轻轻摇动。 4. 在较强的光线下，3分钟内观察凝集现象 5. 做阳性和阴性对照 临床意义 D-D为交联纤维蛋白的特异性降解产物，是纤维蛋白形成并发生降解的特异性分子标志物。D-D增高表明体内有纤维蛋白形成并发生溶解。 临床意义 诊断DIC的重要依据 鉴别原发性纤溶与继发性纤溶 血栓性疾病升高，如深静脉血栓形成、肺梗塞、心梗、重症肝炎等 对抗凝和溶栓治疗的检测 A.在DIC抗凝治疗中，高水平的D-D持续下降，间接说明凝血过程在减 缓或中止，治疗有效。 B.开始因血栓迅速溶解而使血中的D-D明显升高之后D-D则从高水平 很快下降。如不下降，呈持续高水平状态，多提示药物用量不足。 作业 书写ＴＴ实验报告 复习思考题 内源凝血系统、外源凝血系统、国际标准化比值(INR)、 DIC、出血时间、APTT、PT、TT 1.止血与凝血基本机制 2.常见出血性疾病的实验室检查指标 3.检查内源、外源凝血途径筛选试验是哪一项试验? 其参考值与临床意义？