Chromeleon7SOP（U3000 液相变色龙工作站操作SOP）.docx

第 第 PAGE 1 页 共 NUMPAGES 17 页 Thermo U3000-Chromeleon7操作SOP 作者：小鱼YY 一、目的 实验人员根据本规程完成Thermo U3000-Chromeleon7相关操作。 二、适用人员 实验室分析人员。 Thermo U3000-Chromeleon7操作规程 1、打开仪器 依次打开泵、进样器、柱温箱、检测器后面板电源开关，自检成功后，方可进行以下各步。 2、打开软件 打开电脑，点击账户User，密码为user，登入界面，等待约 1～2 min，变色龙服务监视器将会自动启动。 如未启动，双击电脑右下角的变色龙软件的服务管理器，进行激活，如下图： 双击电脑桌面“Chromeleon ”图标，输入用户名、密码进入变色龙软件。出现如下界面： 将界面中各模块左侧的方框勾选，或点击连接按钮将软件与仪器进行连接。 3、排系统气泡 3.1冲洗 打开最上方泵模块面板，将快速清洗阀逆时针拧约2圈。 勾选马达前方框→将需要排液的管路设为100%，点击冲洗，确保清洗阀拧松后，点击“忽略警告执行”，排气结束后会自动停止（5min），也可以再次点击冲洗，手动停止。顺时针拧紧清洗阀。 3.2清洗 分别点击自动进样器模块上的灌注注射器、清洗缓冲环、外部清洗针(每点击一个部分后，左侧模块状态会变为黄色（Noready），一个模块清洗完成后会模块状态会变为绿色（Ready），即可点击下一部分进行清洗。待右侧模块状态变为防止残留，影响检测。如果流动相与清洗溶剂差别较大，为了避免第一个进样后不出峰或出鬼峰，可在清洗完针外部后，点击“到进样位置”将六通阀的状态切换到进样位置以便清洗针内部。 平衡色谱柱 打开柱温箱，安装色谱柱，色谱柱的方向为进样器至检测器。 4.1设置柱温 点击至ColumnOven，将温度控制选择为“On”，设定温度处输入方法温度值。 4.2打开紫外灯 点击UV→勾选紫外灯前方框→输入检测波长。 4.3监视基线 一般勾选Pump Pressure、UV-VIS即可。其余项可根据需要勾选。将所需管路设定为100%，流速逐步上升至目标流速，点击Enter，即可。（若流动相中含有缓冲盐一般以10%甲醇水首先冲柱约半小时后，再以流动相平衡色谱柱） 5、样品放置 以磁性笔触进样器面板上第一个选项，再点击Rotate将目标样品盘移动至前方，或在软件中“使用移动盘或瓶到前部”来转动样品盘。 6、仪器采集方法的建立 点击至数据板块→点击要创建方法的对应项目所在文件夹→“创建”→“仪器方法”。 6.1 采集时间和采集通道设置 在弹出的“仪器方法向导”窗口中输入分析运行时间，通道全部勾选，点击“下一步” 6.2 LPG-3400SD泵常规设置 压力下限设 10bar ，流动相走完时，防止空走。压力上限设定正常使用值的1.5倍或运行梯度时最大压力的 1.2 倍。最大流速加速度为开机后流速从 0 到设定值所需的时间，减速度为关机时从使用值回到0所需的时间。加速度和减速度可设流速的 1/3-3 倍，一般为默认值。设置流速及梯度，设置流动相 B、C、D 通道的％，A通道会自动计算剩余比例。若需在梯度运行前，平衡色谱柱，只需在平衡阶段粉色框中输入，输入方法为负值。 6.3 WPS-3000自动进样器的常规设置 要求进完一针样品要保证有 5S的吸样时间。吸取速度慢些，不易产生气泡；排出速度快些，10－20μL/s；取样高度指进样针离瓶底的距离，常规分析可取默认值2mm，在用到内衬管时要根据情况设定。 进样冲洗，可选择做样期间不洗针（Nowash）或进样后洗针(AfterDraw)及进样前（BeforeInj）洗针。 6.4 TCC-3000柱温常规设置 勾选使用温度控制，输入方法温度，如40℃，其余数默认值即可，点击“下一步” 6.5 UV紫外检测器通道设定 勾选UV-VIS通道，在波长处输入检测波长，数据采集频率和时间常数使用推荐值 10Hz 和 0.12 s即可。 点击完成，输入方法名称即可。 7、处理方法的建立 单击目标文件夹→“创建”→“处理方法”→“基本定量”→保存至目标文件夹 后期再根据样品运行情况，对具体参数进行调整即可。 8、报告模板的建立 单击目标文件夹→“创建”→“报告模板”→选择默认模板→保存至目标文件夹 9、新建序列表 点击年份文件夹→项目文件夹→“创建”→“文件夹”→命名为“xxxxxxxx”(年份月份日期，→点击上步所建日期文件夹→“创建”→“序列”（也可单击目标文件夹→右键，创建序列），序列命名原则为“年份后两位+月+日”或根据不同项目命名原则进行命名，文件夹的层级关系为年份（XXXX）→项目→日期（XXXXXXX） 根据提示输入相应内容，样品数、