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仪器设备标准操作规程
文件编号
XXXXXXX-SOP-0006-2013
1260高效液相色谱议标准操作规程
版次
第一版
页次
1/11
编写人
XXXXXXX
修订状态
第0次
审核人
李维业
发布日期
2013.04.15
批准人
王开祥
实施日期
2013.05.20
1. 环境要求
温度应相对稳定,一般控制在15~25℃,室内保持恒温。相对湿度最好为50~70%。
2. 开机准备
2.1 检查仪器的使用登记记录,了解前一次的使用情况是否处于正常状态。操作人员需认真阅读过本标准操作规程,并经上机前操作培训。
2.2 仪器应处于正常状态,且在计量认证的有效期限内。
2.3 仪器超过一年必须送计量部门或有资格的单位复检,合格后方可使用。
3. 操作步骤
使用者必须了解仪器的工作原理,熟知注意事项,在掌握基本操作后,才能上机。
3.1 操作前的准备
3.1.1 流动相的制备 用高纯度的试剂配制流动相,必要时照紫外分光光度法进行溶剂检查,应符合要求;水应为新鲜制备的超纯水,可用超纯水器制得或用重蒸馏水。凡规定pH值的流动相,应使用精密pH计进行调节。配制好的流动相应通过适宜的0.45um滤膜滤过,用前脱气。配制足量的流动相及时待用。
3.1.2 供试溶液的配制 供试品用规定溶剂配制成供试品溶液。定量测定时,对照品溶液和样品供试溶液均应分别配制2份。供试品溶液在注入色谱仪前,一般用适宜的0.45um滤膜滤过。必要时,在配制供试品溶液前,样品需经提取净化,以免对色谱系统产生污染或干扰。
3.1.3 检查上次使用记录和仪器状态 检查色谱柱是否适用于本次试验,色谱柱进出口位置是否与流动相的流向一致,原溶剂瓶之溶剂与现用流动相能否互溶,流动相的pH值与该色谱柱是否相适应,仪器是否完好,仪器的各开关位置是否处于关断的位置。
3.2 测定前的准备
3.2.1 打开电源总开关,待电压稳定于230V,依次打开打印机、显示器、液相色谱仪器各
仪器设备标准操作规程
文件编号
XXXXXXX-SOP-0006-2013
1260高效液相色谱议标准操作规程
版次
第一版
页次
2/11
编写人
XXXXXXX
修订状态
第0次
审核人
李维业
发布日期
2013.04.15
批准人
王开祥
实施日期
2013.05.20
部分(在线脱气机、四元泵、自动进样器、VWD检测器)、计算机主机的开关。
仪器自动进入初始化状态,开始自检,约30秒钟后,各部件预热完毕,进入待机状态,指示灯为黄色或无色。
3.2.2 待计算机进入WindowsXP后,双击桌面上的Agilent-1260型高效液相色谱工作站软件的快捷方式图标,Instrument 1 online状态,约30秒钟后,计算机进入工作站的操作页面。该页面主要由以下几部分组成:
——最上方为命令栏,依次为File,Run Control,Instrument……等;
——命令栏下方为快捷操作图标,如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件;保存文件……等;
——左边为样品信息栏;
——中部为工作站各部件的工作流程示意图,依次为进样器—输液泵—柱温箱—检测器—数据处理—报告;
——中下部为动态监测信号;
——右下部为色谱工作参数:进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
3.2.3 脱气
手动打开Purge阀,逆时针旋转2-3圈,设置泵流速Flow:5ml/min,单击OK。开泵排气至所有通道无气泡为止。关闭泵或将流速设置为0mL/min,关闭Purge阀。
3.3 色谱条件的设定
色谱条件的设定可以通过以下几种方法实现:
3.3.1 直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。将鼠标移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、检测波长等,单击一下,即可显示该参数的设置页面,键入设定值后,单击“0K”,即完成。
仪器设备标准操作规程
文件编号
XXXXXXX-SOP-0006-2013
1260高效液相色谱议标准操作规程
版次
第一版
页次
3/11
编写人
XXXXXXX
修订状态
第0次
审核人
李维业
发布日期
2013.04.15
批准人
王开祥
实施日期
2013.05.20
3.3.2 调用已设置好的文件,在命令栏“Method”下,选择“Load Method”,或直接单击快捷操作的“Load Method”图标,选定文件名,单击“0K”,此时,工作站即调用所选用文件中设定的参数。如欲进行修改,则可同“6.4.1”项下,在色谱工作参数中作修改;也可以在命令栏“Method”下,选择“Edit Entire Method”,随后工作站即按顺序出现一系列参数设置页面,在每个页面中键入设定值,单击“OK”,即完成。
3.3.3 编辑新文件 先在
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