《生物化学（第2版）》教学课件03蛋白质化学.pptxVIP

;第三章 蛋白质化学;二、蛋白质的化学组成;;三聚氰胺（C3H6N6）;“大头娃娃”;;三、蛋白质的分类;1． 酶 2．结构成分（结缔组织的胶原蛋白、血管和皮肤的弹性蛋白、膜蛋白） 3．贮藏（卵清蛋白、种子蛋白） 4．物质运输（血红蛋白、Na+-K+-ATPase、电子传递体等） 5．细胞运动（肌肉收缩的肌球蛋白、肌动蛋白） 6．激素功能（胰岛素） 7．接受、传递信息（受体蛋白，味觉蛋白） 8．调节、控制细胞生长、分化、和遗传信息的表达（组蛋白、阻遏蛋白） 9．（抗体、皮肤的角蛋白、血凝蛋白等）;第二节　氨基酸;酸水解法： A、稀酸水解蛋白质，得到不完全水解产物。 如：蛋白胨，牛肉膏。 B、浓HCI（6mol/L）、或4mol/L硫酸于1100C的高温下， 真空条件下10~24小时可将蛋白质完全水解。;优点：不破坏色氨酸。 缺点：多数氨基酸遭破坏。产生消旋现象。 所得产物是D-，L-AA的 混合物。 应用：常作为酸法水解的补充，测定蛋白质分子中 色氨酸的含量。;酶法水解：;二、氨基酸的结构和分类;例题：;（1）按R基的化学结构分类：脂肪族、芳香族和杂环族;丝氨酸 （Ser,S）;酸性氨基酸（两羧基一氨基）及酰胺：;碱性氨基酸：; B、芳香族氨基酸;（2）根据R基团的酸碱性质分： 中性氨基酸、酸性氨基酸、碱性氨基酸。;F;Y;+;二十种常见蛋白质氨基酸的分类;4-羟基脯氨酸;(三)非蛋白质氨基酸;三、氨基酸的理化性质;（二）氨基酸的两性解离及等电点;2.氨基酸的解离与环境pH的关系;pH = pI 净电荷=0;小结;3.等电点与氨基酸分子两性解离基团的解离平衡  常数的关系;（2）碱性氨基酸的解离;（3）酸性氨基酸的解离;例题1、四种氨基酸的混合液在pH5.7时进行电泳后，它们在醋酸纤维素膜上的排列顺序如何？;例题3:;4.Handerson-Hasselbalch(汉-哈二氏公式);解：首先写出解离方程;解：写出解离方程;例题3 计算下列溶液的pH值;（2）Gly 和HCl的反应为：;例题4：;5.氨基酸的pH缓冲作用-P63;在pH2.34和pH9.60处，Gly具有缓冲能力。? 起点：100% Gly+ 净电荷：+1 第一拐点： 50%Gly + ，50%Gly± 平均净电荷：+0.5 pH=pK+lg[Gly±]/[Gly+] = pK1 = 2.34 第二拐点： 100%Gly± 净电荷：0 等电点pI 第三拐点： 50%Gly± ，50%Gly- 平均净电荷：-0.5 pH=pK2+lg[Gly-]/[Gly±]=pK2=9.6 终点： 100% Gly- 净电荷：-1;例题2：Glu（pK1α-COOH 2.19，pK2α-NH3+9.67， pKR R-COOH 4.25，pI 3.22） ①写出解离方程 ②指出Glu-和Glu=各一半时的pH值 ③指出Glu总是带正电荷的pH范围 ④指出Glu±和Glu-能作为缓冲液使用的pH范围;（三）氨基酸的重要化学性质;（2）与甲醛的反应-P64 ;（3）与2，4-二硝基氟苯（DNFB）的反应 ; 多肽或蛋白质N端氨基酸的α-氨基也能与DNFB反应，生成DNP-多肽或DNP-蛋白质。;★Sanger 反应? 2.4一二硝基氟苯（DNFB） DNP-氨基酸，黄色，层析法鉴定，被Sanger用来测定多肽的NH2末端氨基酸 ;（4）与异硫氰酸苯酯（PITC）的反应;A、弱碱条件下，生成PTC-蛋白质（PTC-多肽链）;（5）氨基酸的游离α-氨基可被酰氯或酸酐酰化;2.α-羧基参与的反应;3.α-NH2和α-COOH共同参与的反应;短肽的命名：如甘氨酸与丙氨酸形成的二肽;水合茚三酮;;4.个别R基团参与的反应;b/强氧化剂过甲酸的作用下，-SH或二硫键被氧化成磺酸基-P67;d/-SH与5,5-双硫基-双（2-硝基苯甲酸）试剂反应——Ellman反应;例题：;（2）其他R 基团参与的反应;四、氨基酸的分离及分析鉴定;;（一）分配层析-以纸层析为例介绍;3.展层剂的种类 中性展层剂：正丁醇+水（或苯酚+水）—用于单向层析 碱性展层剂：正丁醇：12%NH4OH：95%乙醇=13：3：3 酸性展层剂：正丁醇：80%甲酸：水=15：3：2 ;4.影响Rf值的因素;展液（流动相）pH对Rf 的影响： ;例题：;（二）薄层层析;（三）离子交换层析;;例题：;利用阳离子交换树脂对谷氨酸稀溶液的回收浓缩;氨基酸自动分析仪;（四）高效液相色谱;第三节 肽;肽平面与构象角;