液相常见问题汇总情况.docx

液相常见问题汇总情况 - - - - - -精品可编辑word学习资料 gB5Q9X1O7G9 — — hH1H9D2S6R1 — — lN10N10M1E1P2 常见色谱分析问题解疑 一、产生前沿和拖尾的缘由一般有哪些？ 〔1〕拖尾： 1.干扰峰，优化条件别离 2 色谱柱塌陷，更换色谱柱 3 流淌相 pH 不相宜，调剂 pH 值 4 管路没有接好，存在较大的死体积，可以重 |精. |品. |可. |编. |辑. |学. |习. |资. |料. * | * | * | * | |欢. |迎. |下. |载. 新接一下 〔2〕前沿： 1 溶剂挑选不相宜， 挑选相宜的溶剂 2 样品过载，降低进样量 3 柱温太低，上升柱温 4 色谱柱损坏，更换色谱柱 5 干扰峰，优化色谱条件别离 产生峰前沿的缘由：柱过载，柱头塌陷，溶剂挑选不对 产生峰拖尾的缘由：存在杂质未分开，柱污染，柱子挑选不对； 拖尾峰与柱子有关，可能是过载，稀释样品再做，或换新柱做吧 一般产生托尾峰往往是有机性相近杂质没有分开，可以优化分析方 法，或更换柱子试一试； 也可能由于柱子使用时间太久柱效下降显现塌陷等缘由； 再有也会根样品本身性质有关， 基团需要流淌相中添加能与之结合优化峰形的化学物质， 要依据具体情形而定； 柱子可能污染了吧，溶剂也可能有，或柱效下降； 图谱前沿和拖尾的缘由主要是流淌相挑选不相宜， 可以相应调整流淌相的极性， 或者适当参与酸来调整， 可以得到较好的改善； 一般来讲， 酸碱在流淌相中对于前沿和拖尾影响较大； 柱前沿是可能由于柱超载， 拖尾是可能由于样品被污染， 挑选相宜的流淌相，调剂好 PH 能够改善这以情形； 二、怎样防止拖尾和前沿，有何措施？ 挑选相宜的色谱条件和色谱柱，就可以防止峰拖尾和前沿 在处理样品时挑选相宜的流淌相最为重要， 所以在试验设计时充分了 |精. |品. |可. |编. |辑. |学. |习. |资. |料. * | * | * | * | |欢. |迎. |下. |载. 解所要别离的物质的化学性质和溶解度、 极性等相关问题， 摸条件时找到较好的流淌相，是防止拖尾峰显现的最好方法； 防止拖尾和前沿主要要掌握好溶质的量， 每种色谱方法有肯定的线性 X 围，超过这一 X 围不对称峰如此会显现；要看是由于什么缘由造成的： 分析物本身的性质： 这类问题第一要挑选相宜的色谱柱， 另样品的前处理特别重要，局部样品在分析过程中分解，那确定是拖尾的； 色谱柱问题： 主要由于色谱柱柱效下降等引起， 爱护色谱柱或者更换 流淌相： 流淌相未起到抑制拖尾或者前沿的作用， 应添加适当缓冲剂如三乙胺、醋酸等； 三、一般拖尾比拟厉害的是生物碱类成分的检测， 对此类物质防止拖尾有什么好的建议吗？ 对于生物碱类，应当选用封端了的色谱柱，削减硅羟基的作用，仍有 就是调剂流淌相的 PH 值来防止拖尾 对于生物碱类成分的别离关键在于参与的酸的量，由于你得让成 分被色谱柱吸附后， 能够很好的溶解在流淌相中， 即解吸附下来才行 啊，所以留意你的酸的参与量吧！仍有就是挑选相宜的色谱柱，最重 要喽！ 别离碱性物质，易产生拖尾，一般我们都是在流淌相中加点三乙胺〔即碱性物质〕 . 生物碱类液相色谱一般都会在流淌相里参与少量碱〔二乙胺或氨水 等〕，使流淌相的 PH 偏碱性；不过用一般的 C18 柱来分析可能进不 |精. |品. |可. |编. |辑. |学. |习. |资. |料. * | * | * | * | |欢. |迎. |下. |载. 了几针柱效就不行了，考虑使用宽 PHX 围的 C18 柱； 关 于 生 物 碱 薄 层 问 题 ， 可 以 对 于 薄 层 板 的 话 可 以 用10%NaOH+CMC-Na 溶液进展铺板， 仍可以适当调剂绽开剂 PH 值来防治生物碱拖尾； 应当加三乙胺吧，与三氟乙酸等调剂 PH 值，使用氨基的色谱柱啊， 不管怎么说第一考虑的是色谱柱的挑选； 四、 用 HPLC 进展分析时储存时间有时发生漂移，有时发生快速变化，缘由何在？如何解决？ 关于漂移问题： ① 温度掌握不好，解决方法是采纳恒温装置，保持柱温恒定 ② 流淌相发生变化，解决方法是防止流淌相发生蒸发、反响等 ③ 柱子未平稳好，需对柱子进展更长时间的平稳关于快速变化问题 ① 流速发生变化，解决方法是重新设定流速，使之保持稳固 ② 泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出； ③ 流淌相不相宜，解决方法为改换流淌相或使流淌相在掌握室内进展适当混合 五、液相色谱中峰显现拖尾或显现双峰的缘由是什么？ ① 筛板堵塞或柱失效， 解决方法是反向冲洗柱子， 替换筛板或更换柱子； ② 存在干扰峰， 解决方法为使用较长的柱子， 改换流淌相或更换 挑选性好的柱子 |精. |品. |可. |编. |辑. |