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常规石蜡切片常见问题与解决方案 贵州省威宁县人民医院病理科 方伟建 2019.6 常规病理组织石蜡切片染色是临床诊断的重要辅助手段。 主要流程包括固定、取材、脱水、浸蜡、包埋、切片、染色、封片等。 固定是所有常规病理工作的前置条件： 大标本固定时间不得少于6小时；小标本不得少于3小时。 制片工作一般应在取材后2个工作日内完成（不含脱钙、脱脂等需要特殊处理的标本）。 一张优质是HE切片标准： 厚度4～6μm、完整、厚薄均匀、无皱褶、无刀痕、贴片恰当、染色鲜艳、对比度好。 捞片时载玻片干净，粘贴于载玻片中下1/3处。 制备优质切片的条件： １、包埋恰当。 ２、锋利的刀片。 ３、合适的切片机。 ４、熟练的技术员。 常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题1：切片卷成团 原因： 1、刀太钝 2、刀倾斜角太小 3、切片太厚 解决方案： 1、换新的刀片 2、调整刀的倾斜角 3、调整切片厚度 常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题2：切片破碎或切不成片 原因： 1、组织固定、脱水、透明不彻底 2、浸蜡不足，脱水、透明过度 3、浸蜡温度过高或时间过久 解决方案：1、优化组织处理过程 2、及时更换试剂 3、组织块去脱蜡后重 新脱水 常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题3：切片过分的压缩 原因：1、刀太钝 2、蜡块太软 3、用力过猛或速度太快 解决方案： 1、换新的刀片 2、重新冰冻蜡块 3、动作轻、用力均匀 常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题4：切片不连片 原因： 1、刀刃不锋利 2、蜡块上下端留蜡太少 或不整齐 3、室温过低 4、切片过厚 解决方案： 1、换新的刀片或移动刀口 2、提高室温度或蜡块复温（吹气） 3、调整切片厚度 常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题5：切片粘附于组织 块上 原因：1、室温过高或包埋蜡 熔点太低 2、室内干燥有静电 3、刀片、组织块边缘 的碎片 解决方案： 1、清洁刀边 2、修整蜡块边缘 3、增加环境湿度 常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题6：组织块脱落 原因：1、包埋时组织块与包埋蜡 粘贴不牢 2、蜡块冷冻时间过久 3、组织结构致密 4、切片用力过猛或太快 解决方案： 1、重新包埋 2、组织块复温 3、切片动作轻、速度均匀 常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题7：组织切片不完整 原因：1、包埋不当，没有在一个 面上 2、切片时粗修过多或不够 解决方案： 1、重新包埋 2、调整蜡块，确保获得完 整的切面 常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题8：筛状空洞（“天窗”） 原因：1、粗修后没有细修 2、肝脏、扁桃体、淋巴结、 脾脏和脑组织中更常见 解决方案： 1、粗修后细修表面（无白点） 2、过脆组织表面可以适当复温 常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题9：切面过厚 原因：1、切片机维护不当 2、切片厚度设置过厚 3、石蜡太软 4、刀钝 解决方案： 1、保养切片机 2、熟悉淋巴结、脾脏、 胸腺、扁桃体等细胞丰富组织应该以2-3μm为宜 常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题10：纵行刀痕或纵裂 原因：1、组织中有钙化、钉、 缝合线等异物 2、切片刀有缺口 3、刀口不洁 4、石蜡中有杂质 解决方案： 1、去除蜡块中异物 2、清理刀口