主要的动物病原菌培训课件.ppt

主要的动物病原菌 主要的动物病原菌 胞内菌的基本概念 根据病原菌与宿主细胞的关系，病原菌分为胞外菌和胞内菌两类。 胞外菌是指可以在宿主细胞外的细胞间隙、血液、淋巴液、组织液等体液中生长繁殖的细菌。 胞内菌又分两种，即兼性胞内菌和专性胞内菌。兼性胞内菌是指在宿主体内，主要寄居在细胞内生长繁殖，在体外无活细胞的培养基中亦可生长。专性胞内菌则不论在体内体外，都必须在活细胞内生长繁殖 主要的动物病原菌 一、布氏杆菌属：布氏杆菌 有羊、牛、猪、鼠、绵羊和犬6个种，20个生物型。 是引起多种动物和人发病的病原。 主要的动物病原菌 主要的动物病原菌 1.形态与染色 球杆状，无鞭毛，不形成芽孢。 革兰氏阴性。 主要的动物病原菌 2.培养及生化特性 此属细菌专性需氧，但许多菌株，尤其是在初代分离培养时尚需5%-10% CO2。最适生长温度37℃，最适pH为6.6-7.4。 泛酸钙和内消旋赤藓糖醇可刺激某些菌株生长。 大多数菌株在初次培养时生长缓慢，在48h内罕见形成菌落，常需5-10d甚至20-30d，但实验室长期传代保存的菌株，培养48-72h即可生长良好。 主要的动物病原菌 普通培养基上生长缓慢；在含有3~5%的甘油或血液、血清、葡萄糖的培养基中生长更好； 菌落特点 甘油琼脂：细小、光滑、圆形、湿润、粘稠的灰白色渐至灰黄色菌落 血琼脂：不溶血 马铃薯培养基：蜂蜜状粘稠菌苔，颜色由淡黄色→淡褐色→深褐色；对鉴定有价值 孔雀绿酸性复红培养基上，形成淡绿色菌落 麦康凯上不能生长 主要的动物病原菌 在液体培养基中呈轻微浑浊生长，无菌膜。 但培养日久，可形成菌环，有时形成厚的菌膜；在固体培养基上，菌落可以分为 光滑（S）型菌落 粗糙（R）型菌落 粘胶状的粘液（M）型菌落 主要的动物病原菌 3致病性和毒力因子 将本属分为该属现包括6个种20个生物型， 马尔他布氏杆菌（Br.melitensis）生物型1~3、 流产布氏杆菌（Br.abortus）生物型1~9 猪布氏杆菌（Br.suis）生物型1~5 绵羊布氏杆菌（Br.ovis） 沙林鼠布氏杆菌（Br.neotomae） 犬布氏杆菌（Br.canis）6个种。 主要的动物病原菌 毒力差异 在不同种别和生物型，甚至同型细菌的不同菌株之间毒力差异明显。 对豚鼠的致病性顺序是 马尔他布氏杆菌≥猪布氏杆菌≥流产布氏杆菌＞沙林鼠布氏杆菌≥犬布氏杆菌＞绵羊布氏杆菌。 主要的动物病原菌 引致多种动物和人的布氏杆菌病。细菌可经气溶胶传播，是潜在的生物武器。 本菌不产生外毒素，但有毒性较强的内毒素。 光滑型的流产布氏杆菌入侵机体粘膜屏障后，被吞噬细胞吞噬成为胞内寄生菌，并在淋巴结生长繁殖形成感染灶。 潜伏期2周至7个月，一旦侵入血流，则出现菌血症，由于内毒素的作用致使机体发热。 之后细菌定位于网状内皮系统、乳腺及生殖器官。 在妊娠中期，细菌在富含赤藓醇的胎盘绒毛膜及其周边大量繁殖，导致坏死性胎盘炎，致使孕畜流产。 主要的动物病原菌 4.微生物学诊断 鉴于布氏杆菌病有可能由实验室感染所致，所以发达国家规定凡涉及本菌的样本检测，均应在生物安全2级实验室进行，凡涉及本菌的培养，则需在生物安全3级实验室内操作。 布氏杆菌病常表现为慢性或隐性感染，其诊断和检疫主要依靠血清学检查及变态反应检查。细菌学检查仅用于发生流产的动物和其它特殊情况。 主要的动物病原菌 （1）细菌学检查 病料最好用采集流产胎儿的胃内容物、肺、肝和脾以及流产胎盘和羊水等。 也可采用阴道分泌物、乳汁、血液、精液、尿液以及急宰病畜的子宫、乳房、精囊、睾丸、附睾、淋巴结、骨髓和其它有局部病变的器官。 显微镜检查 病料可直接涂片染色镜检，作革兰氏和柯兹洛夫斯基染色镜检。 主要的动物病原菌 （2）分离培养鉴定 无污染病料:可直接划线接种于前述适宜培养基， 污染病料:则应接种到加有放线菌酮0.1mg/ml、杆菌肽25 IU/ml、多粘菌素B 6 IU/ml和加有色素的选择性琼脂平板。均一式接两套份，分别置大气环境及5%~10% CO2环境，37℃培养。每3d观察一次，如有细菌生长，可挑选可疑菌落做细菌鉴定；如无细菌生长，可继续培养至30d后，仍无生长者方可认为阴性。 挑选可疑菌落，做涂片、染色和镜检，确定为疑似菌后进行纯培养，再以布氏杆菌抗血清（高免血清或A、M单相血清，如不凝时，可再用R血清）作玻片凝集试验。 PCR法作快速诊断。 主要的动物病原菌 （3）血清学检查 有多种检查方法，归纳起来不外乎血清中布氏杆菌抗体检查和病料中布氏杆菌检查两类方法。 用已知抗体可检查病料中是否存在布氏杆菌，或分离培养物是否为布氏杆菌，比细菌学检查法简便快速，因而具有较大实用价值。 荧光抗体技术 反向间接血凝试验 间接炭凝集试验 免疫酶组化