儿童感染性疾病流行性病原学研究.ppt

儿童感染性疾病病原学检查;儿童常见感染病原体类型;细菌培养标本采集与运送;标本采集、运送及处理;标本采集、运送及处理;标本采集、运送及处理;标本采集、运送及处理;标本采集、运送及处理;标本采集、运送及处理;标本采集、运送及处理; 检验程序及方法;(一)传统手工血培养检验方法 1．培养及转种 将血液或骨髓标本注入培养瓶(培养瓶系实验室自行配制或双相血培养瓶)。置于35℃恒温箱内，每天观察并记录培养瓶的变化，包括肉汤浑浊度、沉淀、菌膜、溶血、色素等，双相培养瓶肉汤如有异常，或琼脂斜面上有菌苔、菌落出现，应及时涂片、革兰染色镜检，并根据涂片的细菌形态与染色性选择相应的分离培养基进行转种。转种培养基分别为血平板、巧克力平板、麦康凯、沙保弱、高渗平板等。通常肉汤培养7d如无菌生长则报告阴性结果。 ;检验程序及方法;检验程序及方法;检验程序及方法;特殊细菌培养方法;血及骨髓常规培养的三级报告方式;血及骨髓常规培养的三级报告方式; 临床意义;临床意义;血液感染常见病原菌;血液感染常见病原菌;肠道细菌感染;肠道细菌;肠道细菌;肠道细菌感染性疾病;志贺氏菌属;志贺氏菌属;志贺氏菌属;常用病原学检测方法;分离培养与鉴定;分型;分型;志贺氏菌属抵抗力;志贺氏菌属流行状况;沙门氏菌;沙门氏菌;沙门氏菌;沙门氏菌;沙门氏菌;沙门氏菌;常用病原学检测方法;常用病原学检测方法;常用病原学检测方法;已使用抗生素治疗的患者标本宜使用带抗生素吸附剂的培养基。整个病程均可采集骨髓，特别适用已使用抗生素、病原培养阴性的疑似伤寒、副伤寒病人，以提高检出率。粪便的采集宜在病程的第3～4周、抗生素治疗前或停药3天后采集，带菌者以粪便检测为主。;伤寒、副伤寒沙门菌通过污染的食物、水经口进行传播，尤其通过共用的水，容易造成暴发流行。因此在进行传染源或环境污染调查时，应取水样及食品样本。 ;病原分离;（2）骨髓：取患者骨髓液，直接分离或增菌分离培养。取2滴骨髓液直接滴入血琼脂平板或营养琼脂平板，培养18～24小时后，转种血琼脂平板或营养琼脂平板，培养24～48小时，如果无可疑??落生长，再继续培养24小时。增菌分离培养与血标本方法相同。 ; （4）水和其他外环境标本：标本增菌管／瓶经36±1℃培养18～24小时后，接种到选择性培养基上，置（36±1）℃培养18～24小时，如果没有观察到有可疑菌落生长，再继续培养24小时。 本菌在血琼脂平板、营养琼脂平板、MaC和SS琼脂平板上形成中等大小、无色半透明、表面光滑、菌落边缘整齐的菌落，血平板上无溶血环。产H2S菌株在DHL、SS、XLD琼脂平板上可形成中心黑褐色的菌落。 ;3．病原鉴定 　　（1）初步生化鉴定：从上述分离培养平板上挑取至少3～5个可疑菌落分别接种克氏双糖铁（KIA）斜面或三糖铁（TSI）斜面和动力靛基质一尿素半固体（MIU），观察生化反应。伤寒、副伤寒沙门菌生化反应较有规律，不发酵乳糖、蔗糖，发酵葡萄糖、麦芽糖，甘露醇，但伤寒沙门菌不产生气体，而甲型、乙型和丙型副伤寒沙门菌能产气。吲哚，尿素及V-P试验均阴性，均能产生H2S。　　 （2）血清学分型：初步生化反应符合伤寒或甲、乙、丙型副伤寒沙门菌时，先用A～F群沙门菌“O”多价血清作玻片凝集；若发生凝集再选用O2、O4、O7、O9因子血清做玻片凝集，以判定其群别。 　　;4．抗体检测 　　肥达实验常用于伤寒、副伤划的辅助诊断。一般情况下，患者若未经预防接种，而血清伤寒沙门菌0凝集价在1∶80以上，H凝集价在1∶160以上；甲、乙副伤寒沙门菌的H凝集价在1∶160以上，方有辅助诊断意义。在感染过程中!最常见的是H与O凝集价同时上升，特别是O抗体逐渐增高。有时只做一次血清学检查，不能确定诊断，还需间隔7～10天再采血试验，观察血清抗体是否上升。如果凝集效价随病程的延长而逐渐上升，可证实为伤寒或副伤寒沙门菌的感染。;肠道病毒感染;临床表现;临床表现;临床表现;流行病学;肠道病毒感染;呼吸道细菌感染;急性呼吸道细菌感染;呼吸道细菌感染病原学检查;急性呼吸道病毒感染;呼吸道病毒感染;实验室检查;神经系统细菌感染;实验检查;神经系统病毒感染;实验室检查儿童感染性疾病病原学检查;儿童常见感染病原体类型;细菌培养标本采集与运送;标本采集、运送及处理;标本采集、运送及处理;标本采集、运送及处理;标本采集、运送及处理;标本采集、运送及处理;标本采集、运送及处理;标本采集、运送及处理; 检验程序及方法;(一)传统手工血培养检验方法 1．培养及转种 将血液或骨髓标本注入培养瓶(培养瓶系实验室自行配制或双相血培养瓶)。置于35℃恒温箱内，每天观察并记录培养瓶的变化，包括肉汤浑浊度、沉淀、菌膜、溶血、色素等，双相培养瓶肉汤如有异常，或琼脂斜面上有菌苔、菌落出现