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ICS 65.120
CCS B 46
中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准
NY/T 4124—2022
饲料中T-2 和HT-2 毒素的测定
液相色谱- 串联质谱法
Determination of T-2 and HT-2 toxins in feeds—
Li quid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS)
2022-07-11 发布 2022-10-01实施
中华人民共和国农业农村部发布
I
NY/T 4124—2022
前 言
本文件按照GB/T1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由农业农村部畜牧兽医局提出。
本文件由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC 76)归口。
本文件起草单位:河南省兽药饲料监察所。
本文件主要起草人:韩立、杨洁、司慧民、彭丽、于辉、李慧素、孟蕾、张盼盼、袁聪、赵逢冰、史秀玲、邱天 宝、贾玉华、吴志明。
1
NY/T 4124—2022
饲料中 T-2 和 HT-2 毒素的测定 液相色谱-串联质谱法
1 范围
本文件规定了饲料中 T-2 毒素和 HT-2 毒素的液相色谱- 串联质谱测定方法。
本文件适用于配合饲料(不包括水产配合饲料)、浓缩饲料、精料补充料、添加剂预混合饲料、植物性饲
料原料和宠物配合饲料中 T-2 和 HT-2 毒素的测定。
本文件T-2 和 HT-2 毒素的检出限为2μg/kg, 定量限为5μg/kg。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其 中 ,注日期的引用文件,仅 该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 20195 动物饲料 试样的制备
3 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4 原 理
试 样 中T-2 和 HT-2 毒素经80%乙腈溶液提取,免疫亲和柱净化后,用液相色谱- 串联质谱仪检测,基 质匹配标准曲线校准,外标法定量。
5 试剂或材料
警告 — —T-2 和 HT-2 毒素具有细胞毒性,为了安全,试验人员操作时应戴手套、口罩等防护工具,在 通风橱内操作。凡接触T-2 和 HT-2 毒素的容器,需浸入4%次氯酸钠溶液,过夜后清洗。同时,为了减少 接触霉菌毒素的机会,本文件鼓励直接购买并使用有证标准溶液。
除另有规定外,所用试剂均为分析纯。
5.1 水 :GB/T 6682,一级。
5.2 乙腈:色谱纯。
5.3 甲醇:色谱纯
5.4 甲酸:色谱纯。
5 . 580%乙腈溶液:取乙腈(5 .2)80 mL, 加水稀释至100 mL, 混匀。
5.6 2%甲酸甲醇溶液:取甲酸(5.4)2 mL, 加甲醇(5.3)稀释至100 mL, 混匀。
5.7 0. 1%甲酸溶液:取甲酸(5.4)1 mL, 加水稀释至1000 mL, 混匀。
5.8 标准储备溶液(100μg/mL):T-2 和 HT-2 毒素有证标准溶液(T-2 毒 素 CAS 号:21259-20-1,HT- 2
毒素CAS 号:26934-87-2),于0℃~4℃保存。
5.9 混合标准工作溶液(1μg/mL): 分别准确吸取 T-2 和 HT-2 毒素标准储备溶液(5 . 8)各1 mL 于
100 mL棕色容量瓶中,用乙腈(5.2)稀释定容,0℃~4℃保存,有效期为1个月。
5.10 T-2/HT-2 毒素免疫亲和柱:柱容量2000 ng, 或性能相当者。
5.11 玻璃纤维滤纸:孔径1.6μm。
5.12 微孔滤膜:0.22μm, 有机系。
5.13 注射器:规格20 mL。
2
NY/T 4124—2022
6 仪器设备
6.1 液相色谱-串联质谱仪:配有电喷雾离子源。
6.2 分析天平:感量0.01 g。
6.3 离心机:转速不低于8000 r/min。
6.4 涡旋振荡器
6.5 涡旋混合器。
6.6 固相萃取装置。
6.7 真空泵
7 样品
按 GB/T 20195制备样品,至少200g,粉碎使其全部通过0.425 mm 孔径的分析筛,充分混匀,装入 磨口瓶中,避光保存,备用。选取类型相同,均匀一致且在待测物保留时间处,仪器响应值小于方法定量限 30%的饲料样品,作为空白样品。
8 试验步骤
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