NY_T 4141-2022 动物源细菌耐药性监测样品采集技术规程.docx

ICS 67.120.10 CCS X 22 NY 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 NY/T 4141—2022 动物源细菌耐药性监测样品采集 技术规程 Technical code of practice on sample collection for antimicrobia l resistance surveillance of bacteria from animals 2022-07-11 发布 2022-10-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T 4141—2022 前 言 本文件按照GB/T1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任 本文件由农业农村部畜牧兽医局提出。 本文件由全国兽药残留与耐药性控制专家委员会归口。 本文件起草单位：华南农业大学、中国兽医药品监察所。 本文件主要起草人：刘健华、蔡钟鹏、张纯萍、黄颖、徐士新、宋立、曾振灵、吕鲁超。 NY/T 4141—2022 动物源细菌耐药性监测样品采集 技术规程 1 范围 本文件规定了动物源细菌耐药性监测样品的采集、保存和运输的原则、要求和操作方法。 本文件适用于动物直肠/泄殖腔拭子、咽/喉拭子、鼻拭子、粪便、肠道内容物、生鲜乳、其他病料等样品 的采集、保存和运输。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB19489 实验室 生物安全通用要求 NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 试剂或材料 4.1 要求 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合 GB/T 6682规定的三级水，培养基或缓冲液按附录 A 配制或用商品化产品。 4.2 试剂 4.2. 1 双氧水 4.2.2 甘油。 4.2.3 乙醇 4.2.4 碘伏。 4.3 溶液配制 4.3.1 75%乙醇：取95%的乙醇75mL, 加水至95mL, 或用商品化酒精。 4.3.2 PBS 缓冲液(pH7.4): 按照附录 A 中 A.1 的规定执行。 4.3.3 30%甘油磷酸盐缓冲液(pH7.6): 按照A.2 的规定执行。 4.4 培养基制备 4.4.1 营养肉汤(pH 7.2～7.4):按照A.3 的规定执行。 4.4.2 Cary Blair 氏运送培养基：按照A.4 的规定执行。 4.4.3 Amies 运送培养基：按照 A.5 的规定执行。 4.5 材料 4.5.1 微需氧产气包 4.5.2 厌氧产气包。 4.5.3 无菌离心管、带螺帽离心管。 2 NY/T 4141—2022 4.5.4 采样棉拭子管。 4.5.5 一次性无菌注射器：20 mL。 4.5.6 无菌棉球 4.5.7 密封袋， 4.5.8 镊子。 4.5.9 手术刀/手术剪。 5 仪器设备 5.1 冰箱：2℃~8℃、 -20℃。 5.2 分析天平：感量0.1 g。 5.3 高压灭菌器。 6 采样通用原则和要求 6.1 通用原则 采样应遵循随机原则，保证样品具有代表性，采样所用溶液、培养基和保存样品的材料在样品采集前 均应高压灭菌处理，采样过程应遵循生物安全相关要求。如采集病死动物，动物死亡时间不宜超过12 h。 6.2 样品来源 主要包括鸡场、鸭场、猪场、羊场、奶牛场、肉牛场或屠宰场等。基于各地区动物养殖情况(养殖模式， 养殖规模、地域分布等),选择不同养殖模式和养殖规模的养殖场随机采样。同一集团公司下属养殖场不 超过3个。屠宰场应采集来自不同养殖场的样品。 6.3 样品数量 基于不同细菌流行/携带情况和分离率，确定每个养殖场/屠宰场的样品数量，见附录B 的表 B.1。必 要时，应根据养殖场用药情况、动物日龄或屠宰场动物来源及特殊监测需要等，调整采样数量。 6.4 样品类型 根据分离的菌种特性，采集不同类型的样品，健康动物主要采集直肠/泄殖腔拭子、咽/喉拭子、鼻拭 子、肠道内容物、粪便、生鲜乳等；患病动物采集动物组织、脓汁、痂皮等病料，具体可见附录C 中的表C.1。 7 采样 7.1 直肠/泄殖