水质_总氮--作业指导书.doc

文件编号： 水质 总氮--作业指导书 页 次 PAGE 4/3 实施日期 编制目的：为规范和指导水质中总氮浓度的检验。特制定本作业指导书。 适用范围：适用于地表水、地下水、工业废水和生活污水中总氮的测定。 检验依据：《水质 总氮的测定 碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法》HJ636-2012。 注1：实验中所用的玻璃器皿应用盐酸溶液（1+9）或硫酸溶液（1+35）浸泡，用自来水冲洗后再用无氨水冲洗数次，洗净后立即使用。高压蒸汽灭菌器应每周清洗。 主要试剂配制： 碱性过硫酸钾：用JE502型电子天平称取 40.0 g 过硫酸钾（K2S2O8）（优级纯）溶于600ml水中（可置于50℃水浴中加热至全部溶解）另称取15.0氢氧化钠（NaOH，优级纯）溶于300ml水中。待氢氧化钠溶液温度冷却至室温后，混合两种溶液定容至1000ml，存放于聚乙烯瓶中，可保存一周。 注 ：在碱性过硫酸钾溶液配制过程中，温度过高会导致过硫酸钾分解失效，因此要控制水浴温度在 60℃以下，而且应待氢氧化钠溶液温度冷却至室温后，再将其与过硫酸钾溶液混合、定容。 盐酸溶液（1+9）：根据需要配制的（1+9）盐酸体积V，计算出需要盐酸（1.19g/ml）的体积为1/10V，水的体积为9/10V。量取1/10V的盐酸（1.19g/ml），量取9/10V的水将1/10V的盐酸（1.19g/ml）加入洁净的适量容积的烧杯中，然后加入9/10V的水，边加边搅拌。 注意酸入水，不可水入酸 硝酸钾标准贮备溶液（100mg/L）：将硝酸钾（KNO3）于101型电热鼓风干燥箱中 105℃-110℃下烘干 2h 后放入干燥器中冷却至室温。用ME104E型万分之一电子天平准确称取 0.7218±0.0001 g ，用水溶解后转移至 1 000 ml 容量瓶中，用水稀释至标线，混匀。加入1-2ml三氯甲烷作为保护剂，在0-10℃暗处保存，可稳定6个月。也可直接购买市售有证标准溶液。 硝酸钾标准使用溶液（10.0mg/L）：用10ml无分度（胖度）移液管移取 10.00ml 的硝酸钾标准贮备溶液（100mg/L），转移至 100 ml 容量瓶中， 用水稀释至标线并混匀。临用现配。 校准曲线的绘制 取6支25ml具塞比色管，用10.00ml刻度移液管分别量取 0.00 ml，0.20 ml，0.50 ml，1.00 ml，3.00和7.00 ml硝酸钾标准使用液于25ml具塞磨口玻璃比色管中，其对应的总氮含量分别为0.00、2.00、5.00、10.0、30.0和70.0μg。加水稀释至10.00ml。 碱性过硫酸钾消解：用5.0 ml胖度移液管（无胖度则用刻度移液管）向试样中加 5.0ml碱性过硫酸钾溶液，将比色管的盖子盖紧后．用一小块布和线将玻璃塞扎紧或用其他方法固定，放在大烧杯中置于YM50Z型高压蒸气锅中加热，高压蒸汽锅使用前先打开排气阀，加入RO水至与内锅平齐位置，放入需消解样品，关高压灭菌锅盖，打开总开关，开仪器加热开关，指示灯显示正常即可加热，待温度达到100℃时，关上排气阀，再待压力达到 1.1 kg/cm2，相应温度为 120℃时，保持 30 min 后停止加热。待压力表读数降至零后，取出比色管冷却至室温，按住管塞将比色管中的液体颠倒混匀2-3次。每个比色管分别加入1.0ml配制的盐酸溶液，用水稀释至25ml标线，塞盖混匀。 分光光度测量：使用光程为10mm石英比色皿，在TU-1901型紫外分光光度计上以水作参比，分别于波长220nm和275nm处测定吸光度。TU-1901型紫外可见分光光度计需提前半小时开机预热，打开工作站，新建曲线，点击文件→新建→点击设置参数→测量方法（单波长法）→主波长（220nm）→确定。测量完后点击文件→另存为→自己名字命名的文件夹新建曲线。扣除空白试验的吸光度后，从工作曲线上查得氮的含量。 样品测定前处理：取样一般用胖度移液管，若无合适胖度移液管则用刻度移液管取样。用10ml胖度移液管量取10 ml样品于25ml 比色管中。若试样中的含氮量超过 70 μg 时，可减少取样量并加水稀释至 10.00 ml。 注：消解后的试样如浑浊影响比色，应采取离心（3500 rpm～4000 rpm，3 min～10 min） 或静置取上清液分析（试样中如果细颗粒物较多，澄清时间过长尽量选择离心的方法）。 然后按校准曲线测定步骤进行测定。以水做参比，测定吸光度。扣除空白试验的吸光度后，和对应总氮的含量绘制工作曲线。 结果计算与表示：