SNT 2017-2007拟松材线虫检疫鉴定方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2017—2007拟松材线虫检疫鉴定方法Identification of Bursaphelenchus mucronatus Mamiya Enda2007-12-24 发布2008-07-01实施中华人民共和国发布转童师国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T 2017—2007前言本标准的附录 A、附录 B、附录 C、附录 D、附录 E和附录 F均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国云南出人境检验检疫局负责起草，中华人民共和国上海出人境检验检疫局、中华人民共和国浙江出人境检验检疫局、中华人民共和国江苏出人境检验检疫局、云南农业大学参加起草。本标准主要起草人：杜宇、蒋小龙、宋绍祎、林小佳、吴蓉、林何燕、王扬、喻盛甫。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 SN/T 2017--2007拟松材线虫检疫鉴定方法1范围本标准规定了拟松材线虫的检疫鉴定方法。本标准适用于进出境木材（包括原木、板材、木包装和木屑等)传带的拟松材线虫的检疫鉴定。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。SN/T1132一2002　松材线虫检疫鉴定方法3　符号线虫测计:本标准采用De Man公式，对线虫进行测计。De Man 公式测计参数如下：N-标本数;L-体长（mm或μm，头端至尾端的中线距离，不包括尾尖突）；a体长/最大体宽；b-体长/自头端至食道与肠连接处的长度；体长/尾长（尾长指肛门或泄殖腔口至尾端的长度，不包括尾尖突）；CV自头端至阴门的长度×100/体长（%）；T-雄虫前生殖腺（精巢)端至泄殖腔口的长度×100/体长（%）；St口针长度；Sp交合刺长度；M——-尾尖突的长度。4分类地位拟松材线虫(Bursaphelenchus mucronatus Mamiya .Enda,1979)隶属线虫门(Nematoda)、侧尾腺纲（Secernentea）、滑刃目（Aphelenchida）、滑刃科（Aphelenchoididae）、伞滑刃属（Bursaphelenchus）5原理拟松材线虫是系统侵染寄主茎干部分的内寄生线虫，松墨天牛（Monochamus alternatus Hope）为拟松材线虫的媒介昆虫，可随着染虫材料和传媒昆虫传播扩散，常在进境检疫中被截获。其侵染寄主特点、传播途径、寄主范围、生物学特性和形态特征等是检疫鉴定的依据（参见附录 A)。6仪器及用具6.1木工锯或木工电锯，空心电钻，砍刀。6.2样品袋和标签。6.3贝尔曼漏斗分离器或浅盘。6.4标准套筛（400 目以上）。 SN/T 2017---20076.5生物显微镜。6.6体视显微镜。6.7超净工作台。6.8可调式气候培养箱。6.9恒温培养箱。6.10恒温水浴锅。6.11凹面血。6. 12培养皿、载玻片和盖玻片。6.13酒精灯。6.14线虫挑针。6.15微量移液管、可调微量加样器（0,2μL～1.000uL)6.16控温电热平板。6.17大容量离心机。6. 18普通冰箱。7药品和材料7.1指甲油。7.2石蜡。7.370%的酒精。7.4休眠线虫发育催化液（配坊参见第B.1章）。7.5线虫保存液（配方参见第B.2章）。7.6线虫脱水液（配方参见第B.3章）。7.7PDA 培养基。7.8灰葡萄孢菌（Botrytis cineree8现场检疫8.1核查和直观检验8.1.1核对品名、品种、产品批号、数量、唛头及相关的检验检疫单证等是否与申报相符。8.1.2检查检疫物是否为针叶类木材、有无媒介昆虫侵的痕迹，如：侵人孔、虫道和蛹室等。8.2抽样选取有媒介昆虫侵染痕迹的松木或其加工制品；如无上述特征时，则随机抽样，抽样数量为每批总件数的0.5%～5%,最低不得少于3件,不足3件时,全部抽取。8.3　取样木质包装或其他木材带有树皮时,取样前将树皮清除；有媒介昆虫侵染时，尽量在靠近有侵染痕迹的部位取样;在其他情况下,去除表层的木质部分后,将所抽取的样品劈成长 2 cm～5 cm 和宽 1 cm~2cm的小木段，或用木工空心钻多点钻取木屑（样品量至少为50 g），贴上标签后，送样至实验室。必要时，可将整件样品送交实验室。9实验室检验9.1分离线虫分离可采用贝尔曼漏斗法或浅盘法。9.2镜检初步形态观察：收集线虫于凹面皿中，在体视显微镜下观察，发现线虫后，用挑针挑取，或用微量移2 SN/T 2017—2007液管吸取线虫，转到带小凹面的载玻片或普通载玻片上，制成临时水