研创手性科技MCDP多键合环糊精手性色谱柱操作说明书.doc

多键合环糊精手性色谱柱操作说明书 感谢您使用广州研创生物技术发展有限公司生产的HPLC手性色谱柱，为获得最佳的分离效果和更长的使用寿命，请在使用色谱柱前仔细阅读本操作说明。 1.使用前注意事项 1）出厂的色谱柱保存在异丙醇中,进样前建议用流动相低流速（建议 0.5 mL/min）冲洗一个小时； 2） 色谱柱可适用于正相模式、反相模式和极性有机模式，在不同的模式转化 之前请使用异丙醇过渡（＜0.3 mL/min），过渡体积不小于20 mL。 2.参考操作条件 柱 型 150 ? 4.6 mm 分析柱 250 ? 4.6 分析柱 流动相方向 参照色谱柱标签上的箭头 典型流速 1.0 mL/min 不要超过1.5 mL/min 1.0 mL/min 不要超过1.5 mL/min 柱压范围 10.0 MPa (约1450 psi) 不要超过12.0 MPa (约1750 psi) 温 度 10 ～40 建议水相 ≤85%，不要超过95% PH值范围 3.0-7.5 3、流动相 烷烃/异丙醇 烷烃/乙醇 烷烃/甲醇 甲醇 乙腈 甲醇/水 乙腈/水 100/0 到0/100 100/0 到0/100 100/0 到95/5 甲醇中可含0-100的醇类 乙腈中可含0-100的醇类 100/0 到15/85 100/0 到15/85 3.1正相流动相 表格中烷烃为正己烷，异己烷或正戊烷； 流动相中醇的洗脱能力一般甲醇乙醇异丙醇，且随着流动相中醇的含量提高，样品峰的保留时间缩短； 甲醇在烷烃中的溶解性不好，正己烷中甲醇的最大含量是5％。如果要烷烃中使用甲醇，最好同时加入一定量的乙醇； 色谱柱能使用100％的甲醇或乙腈，如果要将正己烷换成甲醇或乙腈，或者要换成不同的极性溶剂，强烈建议使用100％的异丙醇作为过渡溶剂，过渡流速小一些（异丙醇粘度较大）； 如果待分析样品为酸性(碱性)化合物, 往往要在流动相中使用酸性(碱性)添加剂。对于碱性化合物建议在流动相中加入碱性添加剂，如二乙胺，三乙胺，乙醇胺等；而酸性化合物，一般加入有机酸，如三氟乙酸，乙酸，甲酸等。有机酸或有机碱的加入量一般为 0.1％, 不宜超过 0.5％。 3.2反相流动相 反相流动相一般使用甲醇/水、乙腈/水，流动相允许的最高有机相比例为100％，最高的水相比例为95％； 当需要使用缓冲溶液时，缓冲液的浓度不宜太高，有机和无机的缓冲溶液浓度分别不能超过0.5％和0.3％； 色谱柱可承受的缓冲溶液PH范围为3.0-7.5，超过该范围时会降低色谱柱的寿命。 4、色谱柱保养 强烈建议使用保护柱； 必须使用色谱纯试剂配制流动相，使用前需经0.45 μm滤膜过滤和超声 脱气处理； 在进样前需过滤样品溶液； 在使用含酸/碱添加剂的正相流动相后，需使用异丙醇或乙醇冲洗色谱柱(长柱 ≥40 mL，短柱≥ 30 mL)后封存； 在使用含酸、碱或盐的反相流动相后，应立即使用不少于40 mL甲醇-水 或乙腈-水溶液(70/30，V/V)冲洗色谱柱，然后用甲醇封存；若流动相中不含酸、碱或盐等，直接用甲醇封存； 6）建议不要长期在极端条件下使用色谱柱，以避免色谱柱使用寿命变短。 如果您在使用过程有任何疑问，请与我们联系，欢迎您访问我们的网站得到更为详细的技术支持