可溶性活性磷的测定.docVIP

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可溶性活性磷的测定(钼锑抗法)

原理

在酸性介质中,活性磷酸盐与钼酸铵反应生成磷钼黄,用抗坏血酸还原为磷钼蓝后,于882nm波长测定吸光度。此吸光度与活性磷含量成正比。

二、主要仪器与试剂

1、硫酸溶液CH2SO4=6.0mol/L。在搅拌下将300mL硫酸(ρ=1.84g/mL)缓缓加到600mL水中。

2、钼酸铵—酒石酸锑钾混合溶液

(1)溶解28g钼酸铵于200mL水中(此溶液变浑浊时,应重配)。

(2)溶解6g酒石酸锑钾于200mL水中,贮于聚乙烯瓶(溶液变浑浊,应重配)。

(3)搅拌下将45mL上述钼酸铵溶液加到200mL6mol/L硫酸溶液中,加入5mL酒石酸锑钾溶液,混匀,贮于棕色玻璃瓶中(溶液变浑浊时,应重配)。

3、抗坏血酸溶液溶解20g抗坏血酸于200mL水中,盛于棕色试剂瓶或聚乙烯瓶。在4℃避光保存,可以稳定1个月。

4、磷酸盐标准贮备溶液(0.300mg/L)称取1.318g磷酸二氢钾溶于10mL硫酸溶液中,全量转入1000mL容量瓶中,加水至标线,混匀,加1mL三氯甲烷。此溶液1.00mL含0.300mg磷。置于阴凉处,可以稳定半年。

5、磷酸盐标准使用溶液(3.00μg/mL)量取1.00mL磷酸盐标准贮备溶液至100mL容量瓶,加水至标线,混匀,加两滴三氯甲烷。此溶液1.00mL含3.00μg磷。有效期为一周。

6、仪器分光光度计,2cm或5cm比色皿及一般实验室常备仪器和设备。

三、实验内容和操作步骤

1、绘制标准曲线

(1)量取磷酸盐标准使用溶液0、0.25、0.50、1.00、1.50、2.00mL于25mL具塞闭塞管中,加水至25mL标线,混匀。各浓度依次为0、0.030、0.060、0.120、0.180、0.240mg/L。

(2)各加0.5mL钼—锑混合溶液,0.5mL抗坏血酸溶液混匀。显色5min后,注入2cm或5cm比色皿中,以纯水作参比,于882nm波长处测定其吸光度值Ai。其中浓度为0的比色管中溶液的吸光度为标准空白吸光度Ao。

(3)以吸光度(Ai—Ao)为纵坐标,相应的磷酸盐浓度ρ为横坐标,绘制标准曲线。

2、水样测定量取25mL经0.45μm微孔滤膜过滤的水样至25mL具塞比色管中,按工作曲线的步骤测定吸光度Aw。同时量取25mL纯水按相同步骤测定分析空白吸光度Ab。

四、结果与计算

用(Aw—Ab)值在标准曲线上查得水样磷酸盐浓度,或用标准曲线线性回归方程计算。

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