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挥发脂肪酸含量的测定

A1试剂

A1.1甘油:分析纯。

A1.250%（m/m）氢氧化钠溶液：贮于密封的塑料瓶，使用时吸取清亮而没有沉淀的上清液。

A1.3硫酸溶液，c（1/2H2SO4）=1mol/L

A1.4酚酞指示剂：取0.5g酚酞溶解于100mL95%（V/V）乙醇中。

A1.595%（V/V）中性乙醇：使用前中和至酚酞刚显粉红色。

A1.6氢氧化钠标准溶液：c（NaOH）=0.1mol/L。

A1.7沸石：将沸石粉碎过筛，取0.18mm-0.30mm大小的颗粒。

A2仪器设备

A2.1刻度量筒：100mL容量。

A2.2吸量管：100mL和50mL容量。

A2.3蒸馏仪：蒸馏仪的形状和大小按图A1所示，固定于蒸馏支架上。各组件的要求按A2.3.1-A2.3.6的说明。

A2.3.1蒸馏头：蒸馏头的开关和大小见图A2。

蒸馏头的管壁厚1.25mm±0.25mm。其长臂的球泡下部通过橡胶塞连接于蒸馏瓶。蒸馏头侧孔中心以上10mm处有较小的内表面。

A2.3.2平底蒸馏瓶：由硼硅玻璃制成。容量为310L±10mL。

A2.3.3冷凝管：玻璃管型。内管的外径12mm±0.5mm，壁厚1.0mm±0.2mm；外套管的外径30mm±2mm，壁厚1.25mm±0.25mm，冷凝管上端接口处的内径?20mm±1mm，壁厚为1.25mm±0.25mm。

A2.3.4接收瓶：瓶的结构类似容量瓶。瓶颈部标有两个刻度，一个为100mL，另一个为110mL。

A2.3.5石棉板：直径120mm，厚6mm，中心孔直径约65mm。石棉板用于支持蒸馏瓶在加热器上，防止火焰直接烧到石棉板以上的玻璃表面。蒸馏瓶的平底应刚好接在石棉板的中心孔内。

A2.3.6电热炉，2000W，热力应足够大，能使蒸馏操作在规定时间内完成。

A2.4分液漏斗：250mL容量。

A2.5滴定管：25mL容量，管的顶端连接装有钠石灰的保护管。

A2.6中速滤纸：直径为9cm。

A3分析操作程序

A3.1取样，按GB/T5524进行。

A3.2称取样品：精确称取样品5.00g，精确至0.001g。送样品入平底蒸馏瓶内时，注意不要将样品粘到瓶颈。平行称取两份样品。

A3.3样品的制备

A3.3.1皂化

将20g甘油加入到称取的样品中，再用滴定管加入50%氢氧化钠溶液2.0mL，滴定前应注意抹去滴嘴处的碳酸盐沉积物，放掉前几滴氢氧化钠溶液，之后才开始正式滴定。加入碱溶液以后即连续摇匀（包括使被粘附到瓶上部的所有油滴溶解），并在火焰上加热使之完全皂化，液体变清亮。皂化完后用玻璃表面皿盖好瓶口。皂化过程要注意避免过热。

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GB/T18009—××××

将皂化液冷却至90℃左右，用经过沸腾了15min的沸水烫洗干净的量筒，量取93mL同样的沸水，立即例入皂化液中，注意要将量筒内的沸水倾倒干净。轻轻摇动瓶内的皂化液使之完全溶解。

如果皂化液不清亮，表明皂化不完全。当皂化液变黑而不是浅黄色时，表明加热过度。遇到加热过度这种情况时，要重新称取样品进行新的皂化。

在进行以上操作的同时，用同样数量的甘油代替油脂样品进行空白试验。具体操作同上。

A3.3.2蒸馏

取0.1g沸石加入装有皂化液的蒸馏瓶中，再加入浓度为1.0mol/L的硫酸溶液50mL，然后立即将蒸馏瓶接到蒸馏仪上进行加热，使不溶于水的脂肪酸完全溶化，此时注意不要让皂化液沸腾。然后加大火力，提高加热速度，要求在19min-21min内蒸馏出110mL蒸馏液。蒸馏过程要注意保持足够快的冷却水流，以保证流出的蒸馏液在18℃-21℃。

收取到110mL蒸馏液后立即撤去热源，取下接收瓶并用塞子塞好瓶口，小心不要摇动瓶内物。另用25mL量筒接收剩余的蒸馏液。将盛有蒸馏液的接收瓶置于15℃的水浴中冷却10min，水浴的水面要与接收瓶的内容物等高，液温平衡后取出，擦干瓶外壁，慢慢倒转瓶子，避免水不溶性脂肪酸粘附塞子。上下倒转4-5次使瓶内物混合均匀。混匀过程注意不要强烈振摇。

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GB/T18009—××××

A3.3.3过滤

将干燥的中速滤纸紧密铺贴于过滤漏斗上，将接收瓶中的全部溶液滤入干燥的分液漏斗内，待水不溶性脂肪酸上浮到液体表面，小心放出下部的水层到干燥的250mL三角瓶中（要注意保证所有的不溶性脂肪酸均保留在分液漏斗内），用塞子塞好。三角瓶中的水层溶液作为滤液1，供测定水溶性挥发脂肪酸值使用。

取下蒸馏头，用15mL冷水依次洗涤冷凝管的内壁、接收剩余蒸馏液的量筒、接收瓶、滤器以及分液漏斗。该洗涤水再用滤纸过滤。滤器的大水应能使15mL溶液正好充满至滤器边缘。重复以上洗涤过程两次以上，每次的洗涤水都要完全滤干，保留滤纸，弃掉滤纸。

为了完全溶解并收集水不溶性脂肪酸，取15