耐甲氧西林金黄色葡萄球菌.pptxVIP

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）;概念;国内外发展;分型;临床表现;致病因子;感染危险因素;MRSA的检测;琼脂筛选法：1997年NCCLS推荐的MRSA的确证试验，即MH培养基加NaCl(40g/L)加苯唑西林(6μg/ml)，将菌液(0.5麦氏浊度)点种或画线35°C孵育24h，只要平皿有菌生长，即使一个菌落也是MRSA，该法敏感度为100%，常用作校正其它方法的标准，尤其适用于检测抑菌圈直径处于中介度的金黄色葡萄球菌

浓度梯度(Etest)法：1988年ABBiodisk公司推出，在含20g/LNaCl的MH琼脂平板上，贴上苯唑西林的试条，菌液调至0.5～1麦氏浊度，35°C孵育24h，直接读取MIC值。MIC2μg/ml为敏感，4μg/ml为耐药。Etest法具有精确、可靠、稳定性好的特点，但缺点是价格昂贵

自动化药敏检测:目前有Phoenix系统、Vitek系统、ATB系统、MicroScan系统、SensiterARIS等。将菌液稀释后注入药敏板或孔内，然后通过检测菌液浊度，荧光指示剂的荧光强度或荧光底物的水解反应来判读结果。其优点是快速，但有时对生长缓慢或延迟表达耐药性的MRSA，在3～4h内难以达到检测水平，容易漏检或误报MRSA。

;DNA探针杂交:对于低水平耐药或临界水平耐药的MRSA，应选该方法来检测。用特异性的mecADNA片段经地高辛标记，与可疑菌株进行杂交，有学者报告[13]，DNA探针仅与MRSADNA杂交，与MSSADNA无杂交带，其特异性高于琼脂稀释法，敏感性高于肉汤稀释法，可直接用于临床标本，无需先进行细菌分离培养，但探针较贵，保存期较短。

PCR技术：根据金黄色葡萄球菌TK784的mecA基因DNA序列[14]设计一引物，再裂解提取被测菌的DNA，在一定条件下进行扩增，经琼脂糖电泳后在紫外灯下观察有无与阳性对照菌株(金黄色葡萄球菌ATCC29213)相同的区带。PCR具有较高的灵敏度，只要被测菌有微量的的基因，即出现阳性结果，因此常作为检测MRSA的参考方法。

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