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色谱法概论
第二节
色谱过程及有关术语
二、色谱流出曲线(色谱图)
•色谱流出曲线,在色谱法中,各组分经色
谱柱分离,先后流出色谱柱,流出液中的
组分由检测器得到的信号大小随时间变化
形成的色谱流出曲线,也称色谱图。
•获得:
•(1)间隔一定时间或一定流出体
积,测定流出液中组分的浓度,
以浓度为纵坐标,时间或体积为
横坐标,描点作图即得
•(2)在柱子出口处设置检测器,
如测定流出液的吸光度,换算成
浓度(信号值),连续记录流出
液的吸光度随时间的变化,即得
色谱图(仪器化)。
•流出曲线是柱内组分分离结果的反映,
是研究色谱分离过程机理的依据,也
。
是定性、定量的依据
•色谱流出曲线的意义:
•色谱峰数=样品中单组分的最少个数;
•色谱保留值——定性依据;
•色谱峰高或面积——定量依据;
•色谱保留值或区域宽度——色谱柱分离效能评价
指标;
•色谱峰间距——固定相或流动相选择是否合适的
依据。
三、几个重要的色谱参数及概念
1、基线:当只有流动相通过检测器时,得到
的流出曲线,称为基线。系统噪声,平行横轴。
(。
2、峰高h):色谱峰顶点到基线的垂直距离
3、峰宽
(1)标准偏差(σ):即0.607h处的峰
宽的一半。
(2)半峰宽(W1/2):峰高一半处峰的
宽度(不是峰宽的一半)
、峰宽(
(3)基线宽度W):色谱峰两
b
侧拐点上切线在基线截距之间的距离。
|W、σ、W色谱意义:
b1/2
它们反映被分离的组分分子在
柱内迁移时的离散程度,W、σ、
b
;
W越小,表示分子相对集中W、
1/2b
σ、W1/2越大,表示分子相对分散。
W22ln22.355
1/2
W=4σ=1.699W
1/2
4、拖尾因子、对称因子T:
T为0.95~1.05,色谱峰为对称峰
WAB
T0.05h
2A2A
5.保留值
(1)死时间(t、t):不被固定相所滞留
M0
的组分(空气、甲烷)出现峰值所用的
时间.
•在时间上,它等于流动相分子通过色谱柱
所需的时间,当某组分不被固定相所滞留
时,即完全随流动相移动,其移动速度完
全等于流动相线速度,所以t=t。柱长L
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