2.2.2+动物细胞融合技术与单克隆抗体课件高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

新人教版选择性必修三第2节动物细胞工程二、动物细胞融合技术及单克隆抗体第2章细胞工程

从社中来视频：免疫攻防战从社会中来

1.你从视频中了解到单克隆抗体具有哪些特点?2.请你尝试利用“拆词法分析“单克隆抗体”一词中“单”和“克隆”的含义。单克隆抗体是由单一细胞产生的只能识别一种抗原表位的特异性抗体。单克隆抗体具有能准确识别抗原的特点。从社会中来

3.什么细胞能产生抗体?4.能产生抗体的细胞能否大量增殖?5.什么细胞具有无限增殖的能力?6.能否创造一种既能分泌抗体且增殖能力强的细胞?浆细胞肿瘤细胞具有无限增殖的能力，但不能分泌抗体。浆细胞能分泌抗体，但不能大量增殖。通过动物细胞融合技术可以将浆细胞和肿瘤细胞的特性集中于一种细胞。肿瘤细胞浆细胞从社会中来

自主阅读教材P48，独立思考并回答下列问题：1.动物细胞融合的概念？2.动物细胞融合的过程？3.动物细胞融合的原理？4.诱导动物细胞融合的方法？5.细胞融合后的结果？6.动物细胞融合的意义（优点）？7.动物细胞融合的应用？一、动物细胞融合技术

使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。1、概念：3、原理：2、过程:细胞膜的流动性5、结果：4、诱导方法物理法：电融合法化学法：聚乙二醇（PEG)生物法：灭活病毒诱导法(动物细胞融合特有)与植物细胞融合的方法相同融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。一、动物细胞融合技术动物细胞融合实质及完成的标志：细胞核的融合

正在融合的淋巴细胞与骨髓瘤细胞7、应用：6、意义：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。①已经成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。②特别是利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。一、动物细胞融合技术

比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理步骤细胞融合成功的标志诱导方法结果意义细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞的全能性用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁↓诱导方法原生质体融合↓再生出细胞壁形成杂种细胞↓经植物组织培养杂种植株两个或多个动物细胞↓诱导方法动物细胞融合↓细胞核融合形成杂交细胞电融合法、离心法、聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法电融合法、PEG融合法、灭活病毒诱导法形成杂种植株形成杂种细胞打破生殖隔离，实现远缘杂交育种突破有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能再生出新的细胞壁细胞核的融合

自主阅读教材P49-50，思考并回答下列问题：二、单克隆抗体及其应用①用特定抗原对小鼠进行免疫的原因？②诱导融合后的细胞有几种类型，若仅考虑两两细胞融合呢？③杂交瘤细胞是如何筛选出来的？④是否所有的杂交瘤细胞都能产生所需的抗体？⑤如何扩大培养得到大量的单克隆抗体？⑥整个过程有几次筛选？目的分别是什么？

一个极富创造力的方案：动物细胞融合杂交细胞动物细胞培养单克隆抗体骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体1975年，米尔斯坦和柯勒1984年，诺贝尔生理学或医学奖既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体二、单克隆抗体及其应用

02注射特定抗原从患骨髓瘤的小鼠体内取骨髓瘤细胞的培养多种已免疫B淋巴细胞骨髓瘤细胞诱导融合小鼠的脾脏中获取1、单克隆抗体的制备过程二、单克隆抗体及其应用为什么？产生特定抗体

12022杂交瘤细胞(多种)13置于选择性培养基上培养第一次筛选融合的细胞BB132BB瘤瘤瘤瘤√二、单克隆抗体及其应用

1302克隆化培养抗体检测第二次筛选(抗原-抗体杂交技术)能分泌所需抗体的杂交瘤细胞阳性细胞杂交瘤细胞(多种)

1402体外培养单克隆抗体体内或体外培养能分泌所需抗体的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔二、单克隆抗体及其应用

15【培养杂交瘤细胞的方法比较】项目腹腔培养体外培养优点缺点易于控制培养条件（如无需提供无菌环境等），操作简单，成本较低规模小，产量少可大规模培养，大量生产需要人为控制培养条件，成本相对较高02二、单克隆抗体及其应用

02动物细胞融合动物细胞培养给小鼠注射特定的抗原蛋白B淋巴细胞（免疫）骨髓瘤细胞杂交细胞杂交瘤细胞单克隆抗体能分泌所需抗体的杂交瘤细胞第二次筛选诱导融合选择培养基克隆化培养，专一抗体检验既能大量繁殖又能产生专一抗体体外培养或小鼠腹腔内增殖特异性强灵敏度高可大量制备二、单克隆抗体及其应用第一次筛选

筛选出杂交瘤细胞方法？知识拓展：第一次筛选获得杂交瘤细胞①细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基喋呤阻断。②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但不能分裂增殖。③鼠骨髓瘤细胞中