3.2.2将目的基因导入受体细胞并进行检测与鉴定课件-2024-2025学年高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

第2节基因工程的基本操作程序第2课时将目的基因导入受体细胞并进行检测与鉴定

学习目标1.基于实例分析,掌握将目的基因导入受体细胞的方法以及目的基因检测与鉴定的原理。2.结合聚合酶链式反应扩增片段并完成电泳鉴定实验，掌握实验原理和操作。

知识点一将目的基因导入受体细胞1.导入植物细胞???（2）花粉管通道法?直接注入?

2.导入动物细胞（受精卵）__________技术。显微注射3.导入微生物细胞用______处理细胞,使受体细胞处于一种__________________________的生理状态,再将重组的基因表达载体导入其中。感受态细胞??

知识点二目的基因的检测与鉴定1.分子水平的检测???抗原—抗体杂交2.个体生物学水平的鉴定：抗虫、抗病接种实验等。

?1.实验原理?热变性??相反浓度大小和构象?

2.实验步骤?微量移液器?

?电泳缓冲液电泳槽

?凝胶边缘

【名师点睛】实验操作提示（1）为避免外源等因素的污染，实验中使用的微量离心管、枪头和蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌处理。（2）缓冲液和酶应分装成小份，并在储存。使用前，将所需试剂从冰箱拿出，放在冰块上缓慢融化。（3）在向微量离心管中添加反应组分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换。（4）在进行操作时，一定要戴好一次性手套。

旁栏边角想一想?提示在分子水平上提高转基因抗虫棉的抗虫性和抗虫持久性，包括在棉花中转入多个杀虫基因、构建组织特异性表达的启动子、提高杀虫基因的表达量等。?

结论语句辨一辨（1）为培育抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体细胞。()×?√（3）检测目的基因是否成功表达可用抗原—抗体杂交技术。 ()√?√

（5）基因工程是否成功需进行个体生物学水平的鉴定。 ()√?√

主题一将目的基因导入受体细胞情境探究?

?_______________________________________________________________________________________________________________?

2.将基因表达载体导入农杆菌细胞时，应怎样处理农杆菌细胞？______________________________________________________________________________________________________________________________________________?3.植物的受精卵或体细胞都可以作为受体细胞，如果将目的基因导入动物细胞，选用体细胞是否可行？_____________________________________________________________________________提示动物体细胞分化程度高，全能性受到限制，因此一般采用受精卵作为受体细胞。

方法突破将目的基因导入不同细胞的方法项目植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法显微注射法处理法受体细胞体细胞受精卵原核细胞转化过程目的基因插入质粒的-上导入植物细胞整合到受体细胞的中表达目的基因表达载体提纯取卵（受精卵）显微注射受精卵发育获得具有新性状的动物用处理细胞处于能吸收周围环境中分子的生理状态重组的基因表达载体导入细胞中

视角应用1.[2023江苏扬州高二期中改编]我国科学家在进行抗虫棉的培育过程中独创了“花粉管通道法”，该方法有多种操作方式。下图表示花粉管通道法介导植物基因转移，下列相关说法错误的是()D?

?

2.农杆菌转化法是植物转基因技术中常用的转化方法之一。下列与该方法相关的叙述，错误的是()B?

?

主题二目的基因的检测与鉴定情境探究??2.用什么方法检测目的基因是否表达？_____________________________________________________________________________________________________?

3.如果目的基因是抗虫基因，在个体水平上怎么检测？如果目的基因是耐盐基因呢？___________________________________________________________________________________________________________________提示如果目的基因是抗虫基因，则要通过抗虫接种实验来检测；如果目的基因是耐盐基因，则要用一定