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单糖柱前PMP衍生HPLC测定方法探讨

朱照武;庄洋;向春林;赵娜;李珊;向玲芳;莫开菊

【摘要】ThisarticlediscussedtheimpactofPMPpre-columnderivationonmonosaccharidederivativesfromextractionpHandextractiontimes.Moreover,theinfluenceofmobilephaseontheHPLCchromato-graphicpeaksalsohavebeenstudiedfromtheratioofmobilephase,thepHofbufferandtheconcentra-tionofbuffer.Theresultsindicated:NeutralizedthederivationliquidwithHCltopH7.0couldavoidthelossofderivativesproductstotheutmost.ExtractingthreetimesbychloroformcouldremovealmostPMPandavoidthelossofderivatives.ReducingtheratiooforganicphaseorthepHofbuffercouldimprovetheseperationofpeaks;theasymmetryfactorofpeakscouldbemaintainedintheoptimumrangebyincreas-ingtheconcentrationofbuffer.%从PMP萃取酸度、萃取次数探讨了柱前PMP衍生方法对单糖-PMP衍生物的影响,并从流动相比例、缓冲液pH值、缓冲盐浓度三个方面对单糖柱前衍生HPLC的分离效果进行了优化研究.结果表明:单糖进行PMP衍生后,用HCl中和至pH为7.0,能最大限度避免单糖-PMP衍生产物的损失;使用三氯甲烷萃取PMP三次时,能在除去PMP的情况下避免单糖-PMP衍生产物的损失;降低流动相中有机相的比例或提高缓冲液的pH值,有利于色谱峰分离度的提高;提高缓冲盐浓度,有利于保持色谱峰的对称性.

【期刊名称】《湖北民族学院学报（自然科学版）》

【年(卷),期】2015(033)003

【总页数】5页(P337-341)

【关键词】单糖;PMP衍生物;高效液相色谱;分离度;不对称因子

【作者】朱照武;庄洋;向春林;赵娜;李珊;向玲芳;莫开菊

【作者单位】湖北民族学院生物科学与技术学院,湖北恩施445000;生物资源保护与利用湖北省重点实验室(湖北民族学院),湖北恩施445000;湖北民族学院生物科学与技术学院,湖北恩施445000;生物资源保护与利用湖北省重点实验室(湖北民族学院),湖北恩施445000;湖北民族学院生物科学与技术学院,湖北恩施445000;生物资源保护与利用湖北省重点实验室(湖北民族学院),湖北恩施445000;生物资源保护与利用湖北省重点实验室(湖北民族学院),湖北恩施445000;湖北民族学院生物科学与技术学院,湖北恩施445000;生物资源保护与利用湖北省重点实验室(湖北民族学院),湖北恩施445000;湖北民族学院生物科学与技术学院,湖北恩施445000;生物资源保护与利用湖北省重点实验室(湖北民族学院),湖北恩施445000;湖北民族学院生物科学与技术学院,湖北恩施445000;生物资源保护与利用湖北省重点实验室(湖北民族学院),湖北恩施445000

【正文语种】中文

【中图分类】O657.72

多糖类物质广泛存在于自然界中，近年来，我国对植物多糖展开了广泛的研究，植物多糖的药理活性是研究的重点［1－4］.多糖是由单糖通过糖苷键连接而成的，多糖的单糖组成作为一级结构的主要内容，自然成为研究多糖生物活性的基础［5］.糖类物质因不具有发色基团不能直接使用紫外和荧光检测而限制了分析手段的应用，自1989年Honda等［6－8］首次在弱碱性条件下成功实现PMP糖类衍生，使糖类被标记上紫外吸收基团，具有强烈的紫外吸收，糖类的分析方法就得到快速发展.其中，PMP柱前衍生化HPLC分析成为糖类分析的重要方法.杨兴斌等［9］建立了当归多糖单糖组成的PMP柱前衍生化HPLC方法，Lv等［10］利用PMP柱前衍生化HPLC法分析出绿茶多糖由甘露糖、木糖、阿拉伯糖等9种单糖组成.

尽管PMP在糖类检测方面具有优越性，但是糖类－PMP衍生方法仍存在一定不足.有报道