诊疗临床病原体检查专家讲座.pptx

感染性疾病试验诊疗程序;标本采集、运输和检验方法;多瓶接种①厌氧菌菌血症占菌血症5-15%,②有10%菌血症不是单一微生物引发,③长久使用抗生素患者可展现L型菌.④免疫低下患者易发生真菌感染；依据情况做二种血培养瓶培养,需氧和厌氧或需氧和L型培养。

标本采集操作应注意严格无菌操作，防止污染杂菌。

标本送检接种血液样本培养瓶应马上送检，如因某种原因不能马上送检时，勿放冰箱存放。;尿液惯用清洁中段尿。对于厌氧菌采取膀胱穿刺法搜集、无菌厌氧小瓶运输。

粪便取脓、血、粘液送检，排便困难及婴幼儿可用直肠拭子采集，依据检验目标选取不一样运输培养基及分离培养基提升检出率。

呼吸道标本鼻咽拭子、痰、纤支镜采集物，经气管采集分泌物可防止正常菌群污染，是确定下呼吸道感染理想标本。;脑脊液及其它体液对于脑脊液常见病原菌如脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌，抵抗力弱，采集后应马上接种。对于胸、腹水和心包积液因为含菌量少宜接种量大或按血培养处理。

眼、耳标本用无菌拭子采样，可用角膜刮屑。

泌尿生殖道标本可用尿道口分泌物、外阴糜烂面分泌物、宫颈口分泌物和前列腺液等。

创伤、组织和脓肿标本首先清创，用无菌拭子取材。;二.检验方法;2.病原体特异性抗原检测主要用于不易培养微生物快速诊疗，用已知抗体，利用免疫荧光、酶联免疫技术等检测标本中抗原。

3.病原体核酸检测主要是PCR和DNA探针杂交检测标本中病原体。

4.病原体分离培养和判定细菌培养，将标本接种对应培养基上，依据菌落形态、生化反应判定细菌；不易培养微生物进行细胞培养。

5.血清学检测检测病原体刺激机体产生抗体，IgM型抗体检出为新近感染指标。;细菌耐药性检验;抗生素广泛使用所造成抗生素选择性压力使医院感染控制面临严峻挑战，所以对细菌耐药性发生机制和耐药监测便成为临床微生物检测中一项主要工作。;抗菌药品选择性压力;细菌耐药性及其发生机制;2.生物化学机制

产生灭活酶或钝化酶这些酶可使抗生素失活。如产生β-内酰胺酶、氨基糖苷类钝化酶、氯霉素乙酰基转移酶等。

作用靶位改变作用靶位??变后使抗生素失去作用位点。如甲氧西林耐药葡萄球菌能够产生一个新青霉素结合蛋白，使细菌与β-内酰胺类抗生素亲和力降低而造成耐药。

主动外排机制如铜绿假单胞菌对各种惯用抗生素耐药,主要是因为其外膜存在着独特药品泵出系统。;药品敏感试验;“敏感”即表示测试菌可被测定药品常规剂量给药后在体内到达血药浓度所抑制；

“耐药”即表示测试菌不能被在体内感染部位可能到达抗菌药品浓度所抑制，临床治疗无效。

“中介”者提醒该细菌对常规用量体液或组织中药品浓度反应性低，使用高于正常给药量有疗效。;2.液体稀释法;耐药菌监测试验;2.青霉素耐药肺炎链球菌（PRSP）

青霉素是治疗肺炎链球菌首选药品，耐药菌株对青霉素治疗无效。

应用苯唑西林纸片检测。;3.超广谱β-内酰胺酶（ESBL）检测

主要由革兰阴性杆菌产生，质粒介导对青霉素和三代头孢菌素以下类抗生素广泛耐药。

产酶株不能单独采取青霉素类和三代头孢治疗。;临床感染常见病原体检验;细菌感染细菌培养是最主要确实诊方法

病毒感染细胞培养是最惯用病毒分离方法，抗原和血清学检测临床应用最广泛

真菌感染真菌培养和形态学检测最惯用

寄生虫感染从病人血液、体液、排泄物中检验出寄生虫某一发育虫期，是当前最可靠诊疗方法;细菌感染免疫检测;2．肥达反应（widalreactionWR）

伤寒沙门菌菌体O抗原和鞭毛H抗原均可刺激机体产生对应抗体，O抗原刺激机体产生是IgM，出现较早，H抗原产生是IgG，出现较晚，连续时间较长。

WR利用伤寒和副伤寒沙门氏菌菌液为抗原，检测病人血清有没有对应抗体一个凝集试验。

O抗体1:80，H抗体1:160

A、B、C抗体1:80

O升高H不高可能是感染早期或其它沙门菌

H升高O不高可能是既往感染或预防接种;性传输性疾病试验室检验;1.AIDS检测

分为HIV-1和HIV-2两型，主要经过检测血液中对应抗体诊疗，ELISA用于筛选，WesternBlot用于确诊。

HIV感染后数日或数周内常不能检出抗体，称窗口期，95%受染者在3个月内可测出抗体。;2.梅毒检测

暗视野显微镜检验：在皮损处，用玻片刮取组织渗出液或淋巴结穿刺液，见有活动梅毒螺旋体。

主要依靠血清学试验，依据所用抗原不一样，梅毒血清试验分为以下两大类：

非梅毒螺旋体抗原血清试验专心磷脂作抗原，测定血清中抗心磷脂抗体，亦称反应素。本试验敏感性高而特异性较低，当前普通作为梅毒筛选试验。;性病研究试验室试验（VenerealDiseaseResearchLaboratorytest，VDRL）专心