酵母菌杂交育种.ppt

*结论对杂交株的耐性筛选发现,与亲本相比,部分杂交株的耐酒精性能和耐渗性能显著提高。杂交育种可以通过基因的分离、移动和重排进行重新分布,有可能改善酿酒酵母的发酵特性。本试验中,杂交株的产酒精能力和耐渗性均比亲株有所提高,通过此方法可以达到合并工业菌株特性的目的。第31页,共32页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第32页,共32页，星期六，2024年，5月关于酵母菌杂交育种**目录一酵母菌杂交特点1酵母菌的细胞结构和菌落形态2酵母菌的生活史和繁殖方式3酵母菌的杂交二酵母菌杂交育种的方法标记菌株的选择酵母菌杂交拓展：酵母群体杂交育种方法第2页,共32页，星期六，2024年，5月*一酵母菌杂交特点第3页,共32页，星期六，2024年，5月*1酵母菌细胞结构和菌落形态酵母菌（yeast）是低等真核微生物，分属于子囊菌纲、半知菌纲和担子菌纲。大多数酵母菌为单细胞，一般呈卵圆形、圆形或圆柱形。细胞结构类似于高等生物，细胞壁的主要成分为葡聚糖和甘露糖，此外还有蛋白质和脂类等。酵母细胞除细胞壁之外还有细胞核、核膜、核仁等结构。大多数酵母的菌落和细菌相似，第4页,共32页，星期六，2024年，5月*酵母菌的细胞结构与细菌相似，但比细菌细胞大得多。一个椭圆形的酵母菌细胞长约7.2um，宽5.6nm(圆形直径1—5um).菌落大而厚，菌落表面湿润、粘稠并多呈乳白色，少数为红色。菌落特征表面湿润、粘稠，大多数是乳白色，少数红色（红酵母），在固体培养基上生长时间长了，颜色变暗，呈绉缩状。第5页,共32页，星期六，2024年，5月*2酵母菌生活史和繁殖方式酵母菌是真核生物中最简单的单细胞微生物，具有真核生物所有的共性，染色体结构、功能和高等生物细胞相类似。存在单倍体和二倍体的生活史，二倍体生活力强，生产能力高，可通过杂交得二倍体来育种。第6页,共32页，星期六，2024年，5月*酵母菌的生殖方式酵母菌可以进行无性生殖，也可以进行有性生殖。无性繁殖包括芽殖、裂殖(即少数种类的酵母菌与细菌一样，借细胞横分裂而繁殖)、芽裂(这种方式很少)三种。其中最主要还是出芽生殖(简称芽殖)，即成熟的酵母菌细胞先长出一个小芽体，芽体细胞长到一定程度脱离母细胞继续生长，而后形成一个新个体。有性生殖是以形成子囊孢子的方式进行。第7页,共32页，星期六，2024年，5月*3酵母菌的杂交酵母菌的杂交最主要通过有性杂交，利用两种不同结合型的单倍体菌株或子囊孢子进行的。有的酵母如假丝酵母等不具有性生殖，即不产生子囊孢子，它们的杂交与霉菌一样，是通过准性生殖进行的。酵母菌杂交一般是指异接合型菌株杂交。杂交过程包括子囊孢子接触，结合，合子形成，直至二倍体细胞出牙为止的一系列过程。杂交步骤包括遗传标记菌株的选择和不同遗传标记的异接合型细胞杂交。第8页,共32页，星期六，2024年，5月*二酵母菌杂交育种的法第9页,共32页，星期六，2024年，5月*1标记菌株的选择常用的标记是营养缺陷型或抗性突变基因1．营养缺陷型标记2．抗性标记3．温度敏感性标记4．其他性状标记如孢子颜色、菌落形态结构、可溶性色素舍量、代谢产物产量高低和代谢返速度快慢等，以及利用的碳、氮原种类、杀伤力等其他性状都可以作为重组体检出的辅助性标记。第10页,共32页，星期六，2024年，5月*营养缺陷型菌株的筛选过程营养缺陷型菌株的筛选一般要经过诱变、淘汰野生型菌株、检出缺陷型和确定生长谱四个环节。１诱变剂处理诱变剂处理时与其它诱变处理基本相同。在诱变处理后的存活个体中，营养缺陷型的比例一般很低，通常只有百分之几至千分之几，采用抗菌素法或菌丝过滤法，可以淘汰为数众多的野生型菌株，从而达到浓缩营养缺陷型的目的。２淘汰野生菌的方法1.抗生素法2.菌丝过滤法第11页,共32页，星期六，2024年，5月*２．１抗生素法：是利用野生型菌株能在MM中生长，而缺陷型不能生长，于是将诱变处理液在MM中培养短时让野生型生长，处于活化阶段，而缺陷型无法生长，仍处于“休眠状态”，这时，加入一定量的抗生素，结果活化状态的野生型就被杀死，保存了缺陷型。在选择抗生素时，细菌可以用青霉素，酵母可用制霉菌素。第12页,共32页，星期六，2024年，5月*2．２菌丝过滤法：只适用于丝状真菌，其原理是在基本培养基中，野生型的孢子能发芽成菌丝，而营养缺陷型则不能。因此将诱变处理后的孢子在基本培养基中培养一段时间后，再进行过滤。如此重复数次后，就可以除去大部分野生型菌株，同样达到“浓