（正式版）H-Y-T 231-2018 藻类总脂的提取和测定（正式版）.docxVIP

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Z17

中华人民共和国海洋行业标准HY/T231—2018

藻类总脂的提取和测定

Extractionanddeterminationofthetotallipidinalgae

2018-02-13发布

2018-05-01实施

国家海洋局发布

I

HY/T231—2018

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由国家海洋局提出。

本标准由全国海洋标准化技术委员会(SAC/TC283)归口。

本标准起草单位：国家海洋局第一海洋研究所、中国科学院海洋研究所、中国海洋大学。本标准主要起草人：杨佰娟、李倩、郑明刚、郑立、韩笑天、刘涛、朱明壮、陈发荣。

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HY/T231—2018

藻类总脂的提取和测定

1范围

本标准规定了海洋藻类中总脂的提取和测定方法。

本标准适用于海洋藻类中总脂提取和测定。其他藻类中总脂提取和测定可参考使用。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3方法原理

藻类样品中的脂类化合物，经甲醇氯仿混合溶液提取后，用重量法测定。

4试剂

除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水。

4.1氯化钠(NaCl)。

4.2无水硫酸钠(Na?SO?)。

4.3氯仿(CHCl?)。

4.4甲醇(CH?OH)。

4.5液氮：

4.6甲醇氯仿混合溶液：按照甲醇氯仿体积比2:1配制，在使用前配制。

4.71%氯化钠溶液：称取1g氯化钠(3.1)溶解于水并定容至100mL,有效期1个月。

5仪器和设备

5.1电子天平：感量0.1mg。

5.2粉碎机。

5.3超声波清洗器(200W)。

5.4氮吹仪。

5.5离心机(8000r/min)。

5.6烘箱。

5.7冷冻干燥器。

5.8研钵。

5.9分液漏斗。

5.10具塞离心管。

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HY/T231—2018

5.11鸡心浓缩瓶。

6总脂的提取及测定

6.1藻粉的制备

藻类经冷冻干燥器(5.7)干燥24h。干燥后大型藻经过粉碎机(5.2)粉碎过80目筛，微藻直接进行

5.2步。

6.2提取

6.2.1用电子天平(5.1)称取藻粉约0.2g,放入研钵(5.8)中，加入液氮(4.5)反复研磨2次～3次，每次5min,用7.0mL甲醇氯仿混合溶液(4.6)分2次～3次将研磨后的藻粉转移至离心管(5.10)中，

6.2.2将离心管置于超声波清洗器(5.3)超声提取5min后，置于离心机(5.5)中6000r/min离心15min,收集上清有机相溶液；离心剩余的残渣用1.5mL甲醇氯仿混合溶液(4.6)超声提取2次，每次

5min,合并有机相，转移至分液漏斗(5.9)中。

6.2.3在分液漏斗中加入2.5mL氯仿(4.3)和3.0mL1%氯化钠溶液(4.7),混匀，静置分层，回收

下层。

6.2.4加2.5mL氯仿于原上、中层溶液中再萃取一次，再加2.5mL氯仿于原上、中层溶液中再萃取一次，合并下层液，加入无水硫酸钠(4.2)除水，置于已称重的鸡心浓缩瓶(5.11)中，用氮吹仪(4.4)吹扫至

近干。

6.3总脂测定

鸡心浓缩瓶放置烘箱(5.6)中50℃烘干至恒重，于电子天平(5.1)称量得到总脂和鸡心浓缩瓶的总质量：

7结果的计算

总脂的质量分数w按下列公式计算：

(1)

式中：

m——干藻粉样品质量，单位为克(g);

m?——鸡心浓缩瓶质量，单位为克(g);

m?——总脂和鸡心浓缩瓶的总质量，单位为克(g)。

计算结果表示到小数点后两位。

8精密度

重复性条件下，获得的两次独立测定结果绝对差值不大于两次测定结果算数平均值的10%,以大于这两个测定值的算数平均值的10%的情况下不超过5%为前提。

再现性条件下，获得的两次独立测定结果绝对差值不大于两次测定结果算数平均值的15%,以大于这两个测定值的算数平均值的15%的情况下不超过5%为前提。

HY/T231—2018

参考文献

[1]/defining-micro-and-macro-algae-2924083