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(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利说明书
(10)申请公布号CN104849251A
(43)申请公布日2015.08.19
(21)申请号CN201510228234.6
(22)申请日2015.05.06
(71)申请人广州市疾病预防控制中心
地址510440广东省广州市白云区嘉禾街启德路一号
(72)发明人李军涛陈守义朱伟杨智聪
(74)专利代理机构四川君士达律师事务所
代理人芶忠义
(51)Int.CI
权利要求说明书说明书幅图
(54)发明名称
一种快速检测地沟油的时间分辨荧
光免疫方法及试剂盒
(57)摘要
本发明公开了一种快速检测地沟油
的时间分辨荧光免疫方法及试剂盒，本发
明方法从地沟油中大量繁殖的细菌种类入
手，分析污染地沟油的优势细菌，再确定
其特异成分，来达到鉴别地沟油的目的，
研究方法非常独特，利用地沟油中优势菌
体的脂多糖，筛选单克隆抗体，建立脂多
糖的TRFIA检测方法。本发明所述的方法
具有对地沟油特异性强和检测灵敏度高的
优点，在地沟油的鉴别检测中具有非常重
要的意义。
法律状态
法律状态公告日法律状态信息法律状态
未缴年费专利权终止IPC(主分
类):G01N21/64专利
2023-05-16号:ZL2015102282346申请专利权的终止
日权公告
日
权利要求说明书
1.一种快速检测地沟油的时间分辨荧光免疫方法，其特征在于，
包括如下步骤：
步骤一：优势菌筛选鉴定：
(1)地沟油生产原料样品前处理：选取四份泔水样品，对每份泔水样
品进行4个梯度的稀释，其中加入石蜡和吐温80的目的是将油样乳
化为水溶性溶液，具体方法如下:将泔水样品原液每2ml与1ml
石蜡，2ml吐温80及15ml生理盐水混合，40℃～44℃持续震荡至混合
均匀，之后每毫升样品加入9毫升生理盐水，混合均匀后再每毫升样
品加入9毫升生理盐水至混合均匀，备用；
(2)培养细菌：前处理后，将每个样品的稀释前后不同浓度液体分别
接种到麦康凯(MacConkey)和伊红亚甲蓝(EMB)两种培养基，具
体方法是取液体100μl加入到培养基中央，然后用L型玻璃棒将液
体均匀涂布到平板上，做好标记，置于电热恒温箱37℃培养，
18h～24h后观察菌落生长情况，将形态相近的菌落归类计数，然后
挑选出有代表性的不同形态的菌落接种到血平板，编号并标记来源，
置37℃18h～24h做纯化培养；
(3)细菌鉴定：将纯化培养的菌落，对应每个菌落取相应数量的试管，
每管加3.5ml生理盐水，用棉签在血平板上蘸取适量菌溶于管内，
控制菌悬液麦氏单位在0.5～0.63的范围内，标记后备用，然
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