MM_FS_CNG_0236 动物蛋白质饲料消化率的测定.pdfVIP

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动物蛋白质饲料消化率地测定

适用范围

本方法适用于所有动物性蛋白质饲料，不适用于植物性蛋白质或混合饲料消

化率地胃蛋白酶测定方法.

原理概要

脱过脂地试样，用温热地胃蛋白酶溶液，在恒温、持续不断地搅拌下消化，

过滤分离不溶性残渣，洗涤、干燥，测定残渣地粗蛋白含量.同时，测定空白和

脱脂未酶解试样地粗蛋白含量.

.主要试剂和仪器

主要试剂

胃蛋白酶溶液(％)：将浓盐酸稀释至水中(溶液～)，加热至～℃，加入活性

为∶生化级胃蛋白酶〔若活性不是∶，可使用活性∶生化级胃蛋白酶(不可使用

非生化级胃蛋白酶)，应注意胃蛋白酶溶液中胃蛋白酶浓度应为每毫升〕，并缓慢

搅拌直至溶解.勿在加热板上加热胃蛋白酶溶液或配制时过热.临用前配制.

乙醚；丙酮；

定氮试剂：

硫酸（含量，无氮）；

混合催化剂：硫酸铜（个结晶水），硫酸钾()或硫酸钠()，磨碎混

匀；

氢氧化钠[水溶液（）]；

硼酸[水溶液（）]；

混合指示剂：甲基红乙醇溶液，溴甲酚绿乙醇溶液，两溶液等体积

混合，在阴凉处保存期为三个月；

盐酸标准溶液：（邻苯二甲酸氢钾法标定，）

量取下述规定体积地盐酸，注入水中，摇匀.

()盐酸，

盐酸标准溶液（）盐酸注入蒸馏水中；

盐酸标准溶液（）：盐酸注入蒸馏水中；

蔗糖；硫酸氨（干燥）；

硼酸吸收液：硼酸水溶液（），加入溴甲酚绿乙醇溶液，甲基红乙醇溶

液，氢氧化钠水溶液，混合，置阴凉处保存期为一个月（全自动程序）.

仪器

恒温式平转摇床：温控范围～℃，式或空气浴式均可，转速可调(水浴～)

实验室用样品粉碎机；

分样筛：孔径（目）；

分析天平：感量；

消煮炉或电炉；

滴定管：酸式，、；

凯氏烧瓶；

凯氏蒸馏装置：常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏式；

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锥形瓶、；

容量瓶；

消煮管；

定氮仪：以凯氏原理制造地各类型半自动，全自动蛋白质测定仪器、设备规

定.

.试样制备

取具有代表性试样，用四分法缩分至，然后粉碎至全部过孔筛(目)，混匀装

于密封容器，保存备用.

.过程简述

脱脂

称取～试样用乙醚脱脂(含脂肪小于％可不脱脂，含脂肪％～％建议脱脂，

含脂肪大于％则必须脱脂).脱脂方法可参照：将试样置于滤纸筒中，或用滤纸包

好，放入°烘箱中，烘干分钟（或称侧水分后地干试样，折算成干样重），滤纸

筒应高于提取器虹吸管地高度，滤纸包长度应以可全部浸泡于乙醚中为准.将滤

纸筒或包放入提取管，在抽提瓶中加无水乙醚，在°地水浴（用蒸馏水）上加热，

使乙醚回流，控制乙醚回流次数为每小时约次，共回流约次（含油高地试样约次）

或检查抽提管流出地乙醚挥发后不留下油迹为抽提终点.

取出试样，仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶全部收完，

胃蛋白酶消化

称取脱脂烘干后样品若干克(精确至，含氮量约～)于带盖磨口瓶中，加新配

制地并已预热至～℃地胃蛋白酶溶液，要确保样品完全被胃蛋白酶溶液浸湿，盖

紧瓶盖，将瓶夹于恒温摇床上，于℃恒定搅动进行保温消化.

消化残渣地处理

从搅动器上取下磨口瓶，呈°角放置，让残渣沉淀以上，随后在铺有快速滤

纸地布氏漏斗上抽滤，先用少量水将瓶盖上地残渣洗至滤纸上，再将磨口瓶保持

沉淀时地角度移至布氏漏斗上，慢慢倾出内容物，使之通过滤纸后形成连续地细

流，避免任何不必要地搅动.液体通过滤纸地速度应与倾入地速度相同.

当上层液体通过滤纸后，于瓶中加入丙酮，用拇指盖住瓶口剧烈振摇，放开.

再用拇指堵住瓶口，在滤纸上方将瓶倒置振摇，放开拇指让丙酮和残渣流到滤纸

上.再用一份地丙酮进行洗涤，照上法振摇和倒出.检查瓶子，并用丙酮再次洗涤.

当全部液体通过滤器后，用洗瓶以少量丙酮洗涤漏斗壁上残渣两次，并抽干.从

布氏漏斗上小心取下载有残渣地滤纸，无损地移入凯氏烧瓶中，并将凯氏烧瓶置

于℃烘箱内烘干.

.粗蛋白地测定

.烘干残渣()粗蛋白含量地测定()

.