plackett-burman实验设计及响应值.docx

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谷胱甘肽高产菌株的选育及其培育条件的争论

贾建萍

〔浙江工业大学生物与环境工程学院 杭州 310014〕

摘要：以编号为ZG346的酿酒酵母为动身菌株，通过紫外线和60Coγ射线诱变处理，运用推理育种技术，选育到一株抗氯化锌和乙硫氨酸的突变株0.5Eth400-5。该菌株经摇瓶发酵谷胱甘肽产量为

166.0mg/l，较动身株提高350.0%，每克干细胞含谷胱甘肽19.8mg，较动身株提高318.6%。菌株经

10次传代培育，谷胱甘肽产量下降10.7%，是一株性状较稳定可深入开发争论的优良菌株。在此根底上应用Plackett-Burman试验设计和响应面分析方法对菌体积存谷胱甘肽的培育条件进展了系统争论和优化，得到了1组优化的培育基。承受此优化培育基，谷胱甘肽产量达235.7mg/l，比优化前提高45.4%。在优化的培育条件下进展5L发酵罐试验，谷胱甘肽产量达638.9mg/l。

关键词：谷胱甘肽，酿酒酵母，菌种选育，优化

BREEDINGOFAGLUTATHIONEOVERPRODUCINGSTRAINANDITSCULTURECONDITIONS

JiaJian-Ping

(CollegeofBiologyandEnvironmentEngineering, ZhejiangUniversityofTechnology, Hangzhou 310014)

Abstract:Azincchloride-andethionine-resistantmutant0.5Eth400-5wasobtainedfromitsparentstrain

SaccharomycescerevisiaeZG346byUVand60Coγ-raytreatmentandrationalscreening.Theglutathioneproductivityofthemutantreached166.0mg/lbyflaskculture,whichwas350.0%higherthanthatoftheparentstrain,andtheglutathionecontentinthedriedcellsreached19.8mg/g,whichwas318.6%higherthan

thatoftheparentstrain.Adescendofonly10.7%intheglutathioneyieldofthemutantwasobservedaftertentimesofsubculture.Therefore,theobtainedmutantisarelativelystablestrainthatisworthytobestudiedfurther.Systematicstudieswerecarriedoutontheoptimizationofcompositionsofmediumforaccumulatingthelargestamountofglutathioneinthestrain.ThisoptimizingmediumwasformulatedvasPlackett-Burmandesignandresponsesurfaceanalysis(RSA).Theglutathioneyieldwas235.7mg/lundertheoptimumcondition,whichwas45.4%higherthanthatofnon-optimizedmedium.Theglutathioneyieldwas638.9mg/lundertheoptimumconditionby5Lfermenterculture.

Keywords:Glutathione,Saccharomycescerevisiae,Strainbreeding,Optimization

谷胱甘肽〔Glutathione,简称GSH〕是一种由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸缩合而成的活性三肽。它广泛存在于动植物和微生物细胞中，是最主要的非蛋白巯基化合物，具有重要的生理功能。它可作为某些酶的辅酶，并对一些巯基酶有激活作用，是保护酶和其它蛋白质巯基的一种抗氧化剂，并且在氨基酸转运、维持红细胞膜的完整性、保护血红蛋白及解

除