PCR荧光检测试剂盒生产质控规程.docx

PCR荧光检测试剂盒生产质量掌握规程一.微量加样器的使用规定

微量加样器校正：:使用微量加样器吸10μl10次是否为100μl。

加样前吸头润湿：当吸头排空时，仍会有一些残留的液体以薄膜的形式吸附在吸头里面，所以，在加样时先吸打液体数次，充分润湿吸头管腔,以保证加样的全都性。

加样时吸头应靠试管壁：加样时吸头的液体顺着管壁流出，防止液滴的形成由于其外表张力的作用而阻挡样本的释放。

吸头是否与加样器上吸头套筒密封：样器上吸头与套筒密封完好。

加样时留意第一停点和其次停点：吸液是应留意大拇指按下按钮至第一停点，缓渐渐慢吸入液体。停留1s，然后将吸头提离液面。用吸纸抹去吸嘴外面可能黏附的液滴。放液时经过第一停点，停1-2s后，连续按压到其次停点，排出剩余液体。

PCR反响原液由于有甘油在冷的状态较黏稠,易于1次吸取数人份，慢一些。

边加边看,直观估量,防止跳管。

低温冷藏批量DNA提取液、PCR反响液A和B取出时是否充分混匀后,分装使用，PCR反响液A和B是否避光低温冷藏和使用。

配PCR反响液应先加缓冲液再加PCR反响液充分混匀,必要时倒置混匀,再离心,或用灭菌吸头上下吸几次。

PCR反响液〔包括样品〕应充分混匀:保证PCR反响曲线呈S形，全阴性样品呈近似水平曲线。

2取血清样本1〕

2

取血清样本

1〕因水分蒸发

按〔1〕法混匀,再取25μl加

变浓

水5μl混匀。

2〕冻状、混浊

温水浴37℃溶解按〔1〕法混匀,

或12023rpm离心5分钟，取清

液。

程

序

操作

检查

操作

1

混匀方法

每一次提示留意

倒置混匀、移液器吹打、震荡，50000rpm离心1分钟。

取质控品 冻状、混浊 温水浴37℃溶解按〔1〕法混匀

或12023rpm离心5分钟，取清液。

血清样本稀混匀血清释

阴性血清40μl加阳性血清10μl，按〔1〕法混匀。5倍稀释

质控品稀释 混匀质控品 血清稀释液40μl加质控品

10μl，按〔1〕法混匀5倍稀释。

血清样本DNADNA提取液完好血清样本按〔1〕法混匀，取提取 30μl加DNA提取液60μl，按

〔1〕法混匀，98℃8分钟变性,0℃冷却2-3分钟，12023rpm，离心10分钟,吸取上清液。

质控品DNA分装，有效，呈质控品按〔1〕法混匀，取变性 清液状态，未反30μl5000rpm离心1分钟，复加热、冻融 98℃5分钟变性,5000rpm，离

心

心1分钟,吸取上清液。

8

PCR反响液

混匀状态

取25μl反响液加5μl提取

DNA，按〔1〕法混匀，5000rpm

离心1分钟，5000rpm，离心1

分钟,吸取上清液。

9

PCR反响

室温10-30℃

PCR反响槽四角不放管。

10

设阴性比照

阴性混匀血清

CT〉38

11

阳性参考品

各浓度呈梯度

以PCRA反响液制作标准曲线，

呈直线。

12

阴性质控品B各浓度呈梯度

以PCRA和B反响液制作标准曲

线，呈直线。

**血清稀释液：全阴性血清再加2倍HBVDNA提取液混匀,5000rpm，离心1分钟，混匀血清98℃5分钟变性,12023rpm，离心10分钟,吸取上清液。

三.超净工作台的使用、维护保养与清洁标准操作规程1.目的

建立一个超净工作台的使用、维护保养与清洁标准操作程序，使操作过程标准化。

职责

质量部QC负责本文件的起草，质量部及QC检验人员负责本标准的实施。

范围

本标准适用于超净工作台的使用、维护和保养与清洁。4.内容

超净工作台的主要组成局部：高效过滤器、中效过滤器、通风机、电气掌握及排气管道局部。

安放点的选择：

应安放于卫生条件较好的地方，便于清洁，门窗能够密封以避开外界的污染空气对室内的影响。

安放位置应远离有震惊及噪音大的地方。

严禁安放在产生大尘粒及气流大的地方，以保证操作

区空气的正常流淌。使用前的检查：

接通超净工作台的电源。

旋开风机开关，使风机开头正常运转，这时应检查高效过滤器出风面是否有风送出。

检查照明及紫外设备能否正常运行，如不能正常运行则通知工程部检修。

工作前必需对工作台四周环境及空气进展超净处理，认真进展清洁工作，并承受紫外线灭菌法进展灭菌处理。

净化工作区内严禁存放不必要的物品，以保持干净气流流淌不受干扰。

使用：

使用工作台时，先经过清洁液浸泡的纱布擦拭台面，然后用消毒剂擦拭消毒。

接通电源，提前50分钟翻开紫外灯照耀消毒，处理净化工作区内工作台外表积存的微生物，30分钟后，关闭紫外灯，开启送风机。

工作台面上，不要