植物生理学实验专家讲座.pptx

徐芬芬;植物生理学试验室规则;试验汇报要求;植物生理学试验评分标准;课下：试验汇报评分标准

1、卷面清洁，字迹工整10分

2、语句通畅，简明扼要，逻辑性强，表示准确无概念错误20分

3、预习汇报、试验原始统计、试验汇报齐全15分

4、试验汇报格式规范，重点突出15分

5、试验原始统计要如实认真统计实际操作、察及测定结果20分6、对试验结果讨论要充分有据，论点要正确，与该试验无关内容不要写入汇报中20分

7、剽窃他人汇报者0分;本学期试验内容与安排;试验一

质壁分离法测定植物组织渗透势

;一、试验目标、原理;质壁分离及质壁分离复原;二、材料、器材与试剂;三、实验步骤;4.在试验中确定一个引发半数以上细胞原生质刚才从细胞壁角隅上分离最低浓度，和不引发质壁分离最高浓度。

5.在找到上述浓度极限时，用新溶液和新鲜叶片重复进行几次，直到有把握为止。在此条件下，细胞渗透势与两个极限溶液浓度之平均值渗透势相等。;6．计算

求得C1按下式计算渗透势

按ψπ=-iRTC1计算水势值。

C＝等渗溶液质量摩尔浓度，单位是mol/kg；

R＝气体常数（0.008314MPa/L/mol/K）

T＝绝对温度

i＝解离系数（蔗糖＝1，CaCl2＝2.60）;【思索题】

用质壁分离法测定植物细胞渗透势与用小液流法测定植物组织水势都是以外液浓度算出溶质势为依据，他们之间区分何在。;试验二

植物体内硝态氮含量测定;一、试验目标、原理;二、材料、设备仪器及试剂;三、试验步骤;三、试验步骤;?四、结果计算;试验三

叶绿素a、b含量测定;一、试验目标、原理;生命科学系生物科学试验教学中心;生命科学系生物科学试验教学中心;依据朗伯-比尔定律，最大吸收光谱峰不一样两个组分混合液，它们浓度C与光密度OD之间有以下关系：

OD1=Ca·ka1+Cb·kb1(1)

OD2=Ca·ka2+Cb·kb2(2)

式中，ka1、ka2、kb1、kb2分别为组分a、b在浓度1g/L时，对应波长为λ1、λ2时光密度OD值，即比吸收系数。

波长/nm叶绿素a叶绿素b66382.049.2764516.7545.60将表中数值代入（1）、（2）式，并解方程可得：

Ca=0.00127OD663-0.00269OD645(3)

Cb=0.0229OD645-0.00468OD663(4)

将单位改为mg/L，于是总叶绿素浓度为

CT=Ca+Cb=8.02OD663+20.21OD645(5);1试验仪器高级型分光光度计，离心机，天平，剪刀，研钵，漏斗，移液管等。

2试验试剂丙酮，碳酸钙，石英砂。

3试验材料大叶黄杨叶片。;称取新鲜叶片0.5g→加纯丙酮5ml研磨成匀浆→再加80%丙酮5ml，并转入离心管→充分洗涤研钵→离心→定容至20ml→取上述提取液1ml，加80%丙酮4ml稀释后转入比色杯中，以80%丙酮为对照，测定光密度→计算各种浓度（Ca、Cb）。;四、试验结果计算;1因为植物叶子中含有水分，故先用纯丙酮进行提取，以使色素提取液中丙酮最终浓度近似80%。

2因为叶绿素a、叶绿素b吸收峰很陡，仪器波长稍有偏差，就会使结果产生很大误差。

;六、试验作业;试验四

赤霉素对水稻α-淀粉酶诱导形成;一、试验目标、原理;二、试验材料、仪器、试剂;三、试验步骤;3.α-淀粉酶活性测定取试管4只→编号（清水试验；清水调零；GA3试验；GA3调零）→每管中各加入酶液1ml→70℃恒温水浴加热12min→各加入1ml柠檬酸缓冲液

→①将试验管置于40℃恒温水浴15min→再快速加入预热淀粉溶液2ml→40℃恒温水浴5min→加入NaOH溶液0.5ml终止反应；②调零管中加入2mol/LNaOH溶液0.5ml→混匀→加入预热淀粉溶液2ml.

4.样品测定取以上各管中溶液1ml于15ml刻度试管中→加入DNS试剂1ml→混匀→沸水煮沸5min→快速冷却→定容至12ml→520nm波长测定OD值。;四、结果计算;试验五

植物呼吸强度