实验四电泳技术及详解演示文稿.pdf

实验四电泳技术及详解演示文

稿

在是1\一共有45\于星期一

（优选）实验四电泳技术及

在是2\一共有45\于星期一

原理

1.许多生物分子带有电荷，在电场中可以发生

移动。

2.每种分子迁移率不同，一定时间内在电场中

的迁移距离不同。

在一定pH条件下，每一种分子都

-具有特定的电荷（种类和数量）、

大小和形状，在一定时间内它们

在相同电场中泳动速度不同，各

自集中到特定的位置上而形成紧

密的泳动带。这就是带电粒子可

以用电泳技术进行分离、分析和

鉴定的基本原理。

+

在是3\一共有45\于星期一

二、电泳迁移率

•设一带电粒子在电场中所受的力为F，则

F=QE

（Q为粒子所带电荷，E为电场强度）

•根据Stoke定律，一球形分子在溶液中运动

所受的阻力f为：f=6πrηv

（v为分子移动速度；r为分子半径；η为介质

黏度）

在是4\一共有45\于星期一

•当分子达到动态平衡时，F=f

即QE=6πrηv

移项得v/E=Q/6πrη

v/E:表示单位电场强度时粒子运动速度，称

为迁移率，也称电泳速度，以表示。

因此上式也可表示为：=Q/6πrη

•从上式可推知，带电粒子在电场中的移动与:

粒子大小有关，颗粒愈小愈快

粒子的电荷有关，电荷愈多愈快

粒子的形状有关，愈接近球形愈快

在是5\一共有45\于星期一

三、影响迁移率的因素

1.电场强度（E）

电场强度是指每厘米的电位降。电泳速度与电场

强度成正比。电场强度越高电泳速度越快。

根据电场强度大小，电泳可分为：

常压电泳：2～10V/cm

高压电泳：2～2V/cm

2.溶液的pH值

pH值决定带电颗粒的解离程度，决定物质所带

净电荷的多少。选择合适pH，使混合物中各成分所

带电量差别较大。

pHpI带负电pHpI带正电

在是6\一共有45\于星期一

3.溶液的离子强度

缓冲液的离子强度越高，电泳速度越慢

一般在0.02-0.2mol/L。

4.电渗现象

在电场中液体对固体支持物的相对移动。

电泳介质多孔，且带有可解离的化学基团，

吸附正离子或负离子，使溶液相对带电。

应尽量避免选用有电渗作用的支持物。

在是7\一共有45\于星期一

四、电泳的分