《辣椒素合成酶活力的测定》.pdf

ICS07.080

CCSA40

团体标准

T/CAB

辣椒素合成酶活力的测定

Determinationoftheactivityof

capsaicinsynthase

（征求意见稿）

20XX-XX-XX发布20XX-XX-XX实施

中国产学研合作促进会发布

T/CAB

目次

前言III

1范围1

2规范性引用文件1

3术语和定义1

4原理1

5试剂1

6仪器设备2

7试样制备和试验步骤2

7.1试样酶液的制备2

7.2辣椒素合成酶活力的测定2

7.3辣椒素含量的测定2

8试验数据处理3

9精密度3

II

T/CAB

辣椒素合成酶活力的测定

1范围

本文件描述了测定辣椒素合成酶活力的方法。

本文件适用于生化试剂及科研试验中辣椒素合成酶活力的测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期

的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件。不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括

所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T21266辣椒及辣椒制品中辣椒素类物质测定及辣度表示方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

辣椒素合成酶活力单位capsaicinsynthaseactivityunit

在37℃、pH6.8的条件下，每小时生成1μmol辣椒素所需的酶量为一个酶活力单位，单

位为U。

4原理

辣椒素合成酶催化香兰素胺和8-甲基-6-壬烯酰CoA反应生成辣椒素，通过高效液相色

谱测定辣椒素的生成量，来计算酶活力。

5试剂

除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。

5.1香兰素胺：CAS号7149-10-2，纯度≥98%。

5.2乙酰CoA：CAS号102029-73-2，纯度≥93%。

5.3ATP：CAS号987-65-5，纯度≥98%。

1

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5.48-甲基-6-壬烯酸：CAS号59320-77-3，分析纯。

5.5磷酸钾缓冲液：500mmol/L，pH6.8。

5.6盐酸溶液：500mmol/L。

5.7氯仿：色谱纯。

5.8甲醇：色谱纯。

5.9辣椒素标准品：纯度≥95%。

5.10反应底物溶液：含0.5M磷酸钾缓冲液，pH6.8，1μMMgCl，1μMATP，5μM香

2

兰素胺，5μM8-甲基-6-壬烯酸和5μM乙酰CoA。

使用分析天平准确称取0.095mgMgCl、0.551mgATP、0.948mg香兰素胺、0.851mg

2

8-甲基-6-壬烯酸和4.378mg乙酰CoA溶解在950mL的磷酸钾缓冲液（5.5