T-DNA插入突变在植物功能基因组学中的应用.pdf

生 技 术 通 讯 … LErIr】rERS IN BIOTECHNOLOGY VoI22·00 N～o．O6·NIoovv．，，·2009 rIrI ． doi：10．3969／j．issn．1009—0002．2009．06．036 综 述 T—DNA插入突变在植物功能基因组学中的应用 赵霞，周波，李玉花 东北林业大学 生命科学学院，黑龙江 哈尔滨 150040 [摘要】 T-DNA插入突变在植物功能基因组学研究中发挥着重要作用，广泛应用于大规模植物基因功能分析，是分离新基 因、研究基 因功能的有效工具 。我们简单介绍 了T-DNA插入突变的原理，详细论述 了3种 T-DNA插入突变载体的应用 ，并 综述 了利用T—DNA插入突变克隆新基 因的方法 ，同时指 出了T—DNA插入突变存在 的问题及其发展方向。 [关键词] T—DNA；插入突变 ；植物；功能基 因组学 [中图分类号] Q943．2 [文献标识码] A [文章编号] 1009—0002(2009)06—0880—05 Appfication ofT-DNA Insertion Mutagenesisin FunctionalGenomicsofPlant ZHA0 Xia,ZHOU Bo，LIYu-Hua CollegeofLife Sciences，NortheastForestry University，Harbin 150040，China [Abstract】 T-DNA insertionmutagenesis，asaneffectivetooltoseparateandstudynewgene，playsanimportantrolein functionalgenomicsresearch and widely used in large-scale functionalanalysisofplantgene． In thisreview， the recent advancesofT—DNA inertionmutagenesiswere introduced， including the theory ofmutagenesis， theapplication ofthree typesofvectors，methodsforcloning a new gene by T-DNA inertion mutagenesis，and disadvantagesand developmentof T-DNA inertion mutagenesis． [Keywords】 T—DNA；insertionmutagenesis；plant；functionalgenomics 人类基因组计划极大地促进 了许多物种 的基因组测序工 定地整合到植物基因组中并稳定地表达。T—DNA在植物 中一般 作 ，积累了大量基因序列信息，但许多新基 因的功能却是未知 都 以低拷贝插入 ，多为单拷贝。单拷贝T-DNA一旦整合到植物 的。因此 。当前基 因研究的主流 ，是根据 已知的大量基 因序列信 基 因组 中，就会表现 出孟德尔遗传特性，在后代中长期稳定表 息 ，发展并应用新方法 ，鉴定新基 因的功能 ，即进行功能基 因组 达 ，且插入后不再移动，便于保存p 。早期研究认为，T—DNA在基 学研究。功能基 因组研究策略主要包括正 向遗传学 (forward 因组中的整合是一个随机过程 ，没有明显的偏爱性引【。但近年来 genetics)和反向遗传学 (reversegenetics)。根据突变表型及其遗 有研究表 明，这种随机不是绝对的。Alonso等发现 ，T—