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毕 业 论 文 论 文 题 目：山刺玫茎中二氢槲皮素抗氧化作用研究 山刺玫茎中二氢槲皮素抗氧化作用研究 学 生： 指 导 教 师： 学 院： 专业 (班级)： 1.绪论 山刺玫，学名刺玫蔷薇（Rosa Davurica)，别名：刺玫果、兴安刺玫，俗名野玫瑰，又称大叶蔷薇，属蔷薇科，蔷薇属。 山刺玫适应性强，容易培植，利用价值高，有很好的经济价值。 广泛分布于我国东北、华北、内蒙等地，由于东北蕴藏量丰富，近几年颇受关注。 山刺玫茎叶中存在大量二氢槲皮素。 二氢槲皮素属生物类黄酮，具有很 强的生物活性 。研究山刺玫茎中二氢 槲皮素的抗氧化活性具有重要意义。 近年来，人们对于各种人工合成抗氧化剂的安全性问题进行了广泛研究。人们对人工合成抗氧化剂普遍存在不安心理。目前一些化学合成抗氧化剂已限制或暂停使用，所以具有安全性高、抗氧化能力强、无副作用、防腐保鲜等特点的天然食品抗氧化剂日益受到重视。 山刺玫作为一种野生的经济作物，对其的开发仅局限于山刺玫的花、果及种子的利用，而山刺玫的茎往往因得不到有效利用而将其废弃。鉴于山刺玫茎中含有丰富二氢槲皮素及二氢槲皮素的优良生物活性，本文即研究山刺玫茎中二氢槲皮的抗氧化效果，以增加山刺玫茎中二氢槲皮素的应用范围，提高山刺玫的利用率。 原料与试剂： 二氢槲皮素粗提物 二氢槲皮素精提物 抗坏血酸 乙醇 甲醇 水杨酸 硫酸亚铁 三氯乙酸 冰醋酸 DPPH 2―硫代巴比妥酸 卵磷脂 双氧水（30%过氧化氢） 总抗氧化能力（T-AOC）试剂盒 仪器与设备： 电子天平 FA2004电子天平 SHB-3循环水多用真空泵 RE-52A旋转蒸发仪 TDL-5台式离心机 722型可见分光光度计 电热恒温股份干燥箱 SWB-2000水浴恒温摇床 DK-98-I型电子恒温水浴锅 二氢槲皮素的制备 山刺玫茎→干燥→粉碎（过80目筛）→乙醇浸提→抽滤→加盐酸水解 得二氢槲皮素的乙醇粗提物，显色后测吸光度，由二氢槲皮素标准曲线所的公式计算提取的二氢槲皮素浓度 。 将提取后的二氢槲皮素粗提物使用真空旋转蒸发仪浓缩，将浓缩后的提取物使用D4020大孔树脂，70%乙醇溶液洗脱得二氢槲皮素精提物。 采用的抗氧化评价方法 试验方法 反应体系中依次加入FeSO4溶液3mL，H2O2溶液3mL，摇匀，加入水杨酸溶液3.5mL，摇匀，于37℃水浴中恒温15min，取出后在510nm处测其吸光值A0。然后加入一定浓度被测液0.5mL，摇匀，37℃水浴继续加热15min，取出再测其在510nm出吸光度Ax。平行三次。 试验结果以清除率表示： ·OH 清除率（%）= 式中：A0——空白对照吸光度； Ax——加入被测液后吸光度。 试验方法 标准曲线的绘制 准确称取1，1-二苯代苦味酰基（1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl）DPPH标准品5mg，用甲醇定溶至100mL。得浓度为0.5mg/mL的母液，再用甲醇稀释成0.002、0.004、0.006、0.008、0.010、0.020、0.030、0.040 mg/mL的溶液，用722型分光光度计于517nm处分别测定吸光度，制作标准曲线 。 样品抗氧化活性测定 将配制好的DPPH·甲醇溶液于517nm处测吸光度，参照标准曲线得DPPH·甲醇溶液的标准浓度。取一系列不同浓度待测样品的甲醇溶液0.2mL，加入7.8mL浓度为0.025mg/mL DPPH·甲醇溶液，立即混匀，于暗处放置30min，取出在517nm处测吸光度。平行三次。 试验方法 取3.6mL卵磷脂溶液，加入0.4mL待测液，之后加入0.4mL FeSO4溶液催化氧化反应，混合后置于恒温水浴摇床上，37℃避光保温1h，然后加入1mL三氯乙酸溶液，再加入1mL TBA，摇匀后沸水浴15min，迅速冷却，