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内毒素的检测(鲎实验) 新 乡 医 学 院 微生物学教研室 概 述 内毒素主要生物学活性有: 致热作用;白细胞反应;感染性休克; DIC 等。 需要用来检测内毒素的情况: 用来检测所配制的输液用品或生物制品中是否含有内毒素; 临床上为了及时地确定患者是否有革兰氏阴性菌感染(内毒素休克)引起的内毒素血症等。 检测内毒素的方法有家兔发热法和鲎实验法,家兔发热法比较烦琐,且灵敏度不高,故现在多用鲎实验法,鲎实验法灵敏度高,可检测小于10ng/ml的内毒素。 原 理 材 料 鲎试剂 鲎试剂溶解水 无菌吸管 方法及结果 方法: 1.取两支鲎试剂打开,分别加入0.1ml 鲎试剂溶解水,使之溶解 2.其中一支加入0.1ml内毒素,标记上实验组,另一支加入0.1ml溶解水,作为对照 3.垂直放入37℃温箱,20--30分钟观察结果 结果: 实验组出现凝固,对照组不出现凝固 测试题 名词解释: 细菌L型 简答题: 微生物的特点有哪些? 细菌的特殊结构有哪些?它们的作用是什么?光学显微镜下不可见的是哪种特殊结构? * * * * 甲醛处理不形成类毒素 强,可刺激机体产生抗毒素,可被制成类毒素 抗原性 较弱,毒性效应大致相同 强,有选择性,引起特殊表现 毒性 160 ℃,2-4h被破坏 60-80 ℃,30min被破坏 稳定性 脂多糖 蛋白质 化学成分 为细胞壁成分,菌体崩解 活菌分泌,少数为菌体崩解 存在部分 G-菌 G+菌,及部分G-菌 来源 内毒素 外毒素 区别要点 鲎(hòu)是一种海洋节肢动物,其血液中含有一种有核变形细胞,这种细胞的胞浆中含有凝固酶原和凝固蛋白原。 内毒素(LPS) 激 活 凝固蛋白原 凝固蛋白 (溶解状态) (凝胶状态) 凝固酶原 凝固酶 BACK
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