257-5 紫外分光光度计结构与实验技术.pptVIP

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§5 紫外分光光度计结构与实验技术 一、紫外分光光度计结构 * 紫外分光光度计主要由光源、单色器、样品池(吸收池)、检测器及放大器和记录显示系统所组成。 因为玻璃会吸收紫光,灯泡必须用石英材料 1、光源 钨灯丝和氢灯两种 钨灯丝适宜使用的范围是360nm~1000nm; 氢灯或氘灯适宜使用的范围是150nm~360nm。 单色器是指能将来自光源的复色光按波长长短顺序色散为单色光,并能任意调节波长的装置。常由棱镜和光栅组成。经棱镜或光栅色散成一系列由单色光带组成的光谱,逐个从单色器的出口狭缝射出。 可见光区可使用玻璃制的样品池(玻璃在波长<200nm有吸收),紫外区可使用石英样品池(石英在波长<200nm无吸收)。样品池和参比池需要配对(即完全相同的两个),其厚度(光束通过溶液的路径长度)一般为1mm、2mm、5mm、1cm、2cm、4cm。如在定量测定时,所使用的一组样品池要完全一致。 2、单色器(分光系统) 3、样品池(参比池) 检测器又称接受器,透过试液的光用光电管来接受。由单色器的出口狭缝射出的单色光束被旋转折光器分成两束按一定频率交替投射到样品池和参比池上,如果样品池中样品吸收了部分光辐射能,则透过样品池和参比池的两光束不再平衡。光信号经光电倍增管及电子元件组成的检验器、放大器进行检验、比较和放大。放大后的电信号由显示记录系统输出吸光度、波长等数据或给出吸收曲线。 4、检测器 通常在紫外分光光度计中,装置有紫外光源-氘灯及可见光源-卤钨灯,只需切换光源,就可以用来用来测定可见吸收光谱。因此也称为紫外-可见分光光度计。 一般紫外分光光度计光学系统的结构有两类: 一类是单波长分光光度计; 一类是双波长分光光度计。 1、波长校正 2、吸光度校正 3、吸收池校正 二、紫外分光光度计的校正 1、溶剂对样品具有良好的溶解能力; 3、在所测定的波长区域无明显的吸收; 三、紫外吸收光谱中使用的溶剂 2、不与样品发生化学反应, 溶质与溶剂间的相互作用小; 190 211 278 297 乙腈 二氧六环 苯 石油醚 205 210 255 202 环己烷 乙醚 乙酸 甲醇 195 205 254 330 正己烷 乙醇 乙酸乙酯 丙酮 205 203 245 305 水 异丙醇 氯仿 吡啶 透明界限/nm 溶剂 透明界限/nm 溶剂 透明界限/nm 溶剂 透明界限/nm 溶剂 紫外光谱测量常用溶剂的透明界限 *

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