HPLC-ELSD法分析注射用硫普罗宁含量及有关物质.doc

HPLC-ELSD法分析注射用硫普罗宁含量及有关物质 陈来景，郭庭莉，刘鸿敏，张冬云 （河南省新谊药业股份有限公司，河南 新乡453731） [摘要] 目的：建立注射用硫普罗宁含量及有关物质高效液相色谱—蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）检测方法。方法：采用Kromasil C18（250mm ×4.6mm，5μm）色谱柱；柱温30℃；甲醇—0.5%醋酸溶液 （20：80）为流动相；流速0.8 ml·min-1；蒸发光散射检测器漂移管温度44℃，载气2.4Bar，撞击器开。结果：进样量在5.24μg～25.55μg范围内与峰面积的对数呈良好线性关系（r=0.9994），重复性试验RSD为1.08%，检测限和定量限分别为0.2μg和0.5μg。结论：方法快速、简便，结果准确可靠，重复性好。 [关键词] 注射用硫普罗宁；含量；有关物质；高效液相色谱法；蒸发光散射检测器 中图分类号：R917 文献标识码：A HPLC-ELSD Analysis of Tiopronin for Injection and Its Related SubstancesChen Lai-jing，GUO Ting-li，Liu Hong-min，Zhang Dong-yun (Henan Xin-Yi Pharmaceutical Co., Ltd.,Xinxiang Henan 453731) [Abstract] Objective: To develop an HPLC-ELSD method for the determination of Tiopronin for Injection and its related substances method . Methods: The column:Kromasil C18 (250mm × 4.6mm, 5 μ m).The column temperature: 30 ℃.The mobile phase: methanol -0.5% acetic acid (20:80).Flow rate: 0.8 ml·min-1. The Drift tube temperature: 44 ℃. Gas Operation Pressure: 2.4 Bar.Impactor on . Results:The calibration curve was linear in the rang of 5.24μg ~25.55μg(r=0.9994). The repeatability(RSD) was 1.08%. The limit of detection and quantification were 0.2 μ g and 0.5μ g respectively. Conclusion: The method is simple and rapid,the results are accurate and reproducible. [Key words] Tiopronin for Injection; Content Determination; related substances; HPLC; ELSD 硫普罗宁首先在日本上市，而后德、意、美、瑞士等国家相继作为改善肝功能药物应用临床。 一、材料与试剂 Agilent 1100型液相色谱仪；Alltech ELSD2000+蒸发光散射检测器；浙江大学N2010色谱工作站；Kromasil C18（250mm ×4.6mm，5μm）色谱柱。注射用硫普罗宁（河南省新谊药业股份有限公司）；硫普罗宁对照品（河南省联谊制药有限公司）；右旋糖酐40（许昌双马万通制药有限公司）；甲醇、冰醋酸为色谱纯。 二、实验方法 1色谱条件 色谱柱：Kromasil C18（250mm ×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇：0.5%醋酸溶液 （20：80）；流速：0.8 ml·min-1；柱温：30℃；进样量：10μl；蒸发光散射检测器漂移管温度44℃，载气2.4Bar，撞击器开。 2样品溶液制备方法 取注射用硫普罗宁分别加入双氧水、浓氨水、冰醋酸、及纯化水，进行相应的氧化、碱水解、酸水解、80℃升温破坏试验，之后以流动相将破坏后样品溶解，制备成相应的破坏试验考察溶液；另取硫普罗宁、右旋糖酐40，分别以流动相溶解，制备成原辅料对照溶液。 三、实验结果： 3.1专属性 所采用方法能对样品中各成份进行有效分离，结果详见图1～图7。 3.2线性范围 精密称取硫普罗宁适量，以流动相溶解定容，制成浓度分别为0.524g·L-1、0.822 g·L-1、1.079 g·L-1、1.286 g·L-1、1.561 g·L-1、2.016