丹参分散片中丹参总酚酸和丹酚酸B的含量测定方法研究.doc

丹参分散片中丹参总酚酸和丹酚酸B的含量测定方法研究 马能溢，宋英*，钱佳华 （上海市中药研究所，201203） 摘要：目的 建立丹参分散片中丹参总酚酸及丹酚酸B的测定方法。方法 以丹酚酸B作对照品，采用UV法测定丹参分散片中丹参总酚酸的含量；采用HPLC法测定丹参分散片中丹酚酸B的含量。结果 本品中丹参总酚酸在0.20mg~1.20mg范围内呈良好的线性关系（r=0.9998，n=6），平均回收率为99.69%，RSD=0.97%；丹酚酸B在0.44μg~2.20μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9999，n=5)，平均回收率为95.63%，RSD=1.22%。结论 本方法简便可行，重复性好，可有效控制丹参分散片的质量。 关键词：丹参分散片；UV；HPLC；丹参总酚酸；丹酚酸B [所属专业]药剂（药剂质量标准研究） 丹参为唇形科鼠尾草属植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎，是中医临床治疗心脑血管疾病的常用药材，祛瘀止痛，活血通经，对心血管系统，能扩张血管，加快血流，改善微循环，改变血液黏滞性[,2]。现代药理学研究表明水溶性酚酸类是丹参的主要有效成分，其中丹酚酸B含量最高，活性最强[3,4]。为进一步提高药物生物利用度，因而将其制成分散片，与普通片剂相比，在崩解及溶出速率方面都大大增加。为了控制丹参分散片的质量，保证疗效，本文采用UV法对丹参总酚酸进行含量测定，采用HPLC法对丹酚酸B进行含量测定，方法简便、准确、可控。 1 仪器与试药 1.1 仪器 LC-10ATVP高效液相色谱仪（岛津公司）；UV-2401PC型紫外分光光度仪（岛津公司）；CQ型超声波清洗器（上海沪超声波仪器有限公司）；AG285型电子天平（METTLER公司） 1.2 试药 所用试剂中除甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。丹酚酸B对照品（中国药品生物制品检定所，批号 111562-200605）；丹参分散片（自制）。 2. 总丹参酚酸的含量测定 2.1 溶液的制备 2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取丹酚酸B对照品，加60%甲醇制成0.40mg/ml溶液，作为对照品储备液。 2.1.2 供试品溶液的制备 取丹参分散片10片，研细，取约0.15g，精密称定，至50ml容量瓶中，加入40ml60%甲醇，超声30min，放冷，以60%甲醇定容，摇匀。过滤。精密量取续滤液1ml至10ml容量瓶，以60%甲醇定容，摇匀，即得。 2.1.3 阴性样品溶液的制备 根据处方制成不含丹参提取物的分散片，按2.1.2项下供试品溶液制备方法处理，作为阴性样品溶液。 2.2 波长的选择 精密量取2.1.1项下对照品储备液2ml，至25ml容量瓶，加60%甲醇定容，摇匀，作为对照品溶液，同上述另2种溶液于紫外分光光度仪中在190nm～00nm范围内进行扫描，记录紫外吸收光谱，结果见图1，所测得样品与对照 品最大吸收波长为286nm，且空白样品无干扰。 图1 波长扫描图 1 丹酚酸B对照品；2 供试品；3 阴性样品 2.3 线性关系考察 精密量取2.1.1项下对照品储备液0.5，1，1.5，2，2.5，3ml分别至25ml容量瓶中，以75%甲醇定容，摇匀。以75%甲醇为空白，在286nm波长处测定吸收度。以吸收度为纵坐标、丹参总酚酸浓度为横坐标绘制标准曲线，得回归方程：Y=21.286X-0.0082，r=0.9998，n=6。表明丹参总酚酸在0.20mg~1.20mg范围内呈良好的线性关系。 2.4 重复性试验 取同一批号的丹参分散片，按2.1.2项下供试品溶液制备方法，重复进行6次平行试验，测定吸收度，结果RSD＝1.21％，结果表明本方法重复性良好。 2.5 加样回收率试验 称取已知含量的丹参分散片（批号5份，每份约0. 1g，精密称定，至50ml容量瓶中，分别精密加入2.1.1项下对照品储备液5ml，按2.1.2项下方法处理，测定吸收度。根据标准曲线计算样品中丹参总酚酸的含量。结果见表1。 表1 UV加样回收率试验结果 样品 量 (g) 含量( mg) 加入量(mg) 测得量(mg) 回收率(%) 平均 回收 率(%) RSD% 0.0981 6.17 2.00 8.19 101.24 99.69 0.97 0.0996 6.26 2.00 8.24 98.88 0.1023 6.43 2.00 8.42 99.21 0.1089 6.85 2.00 8.85 100.02 0.0983 6.18 2.00 8.16 99.10 结果丹参总酚酸以丹酚酸B计平均回收率为99.69%，RSD为0.97%，表明此方法的加样回收率良好。 2.