第六章 化学毒物的一般毒性作用.ppt

固定剂量法 先计算LD50 最少40只动物随机分成两组一为连续染毒组，一为一次染毒组 对于连续染毒组给予1/20—1/5LD50的剂量一直到该组动物的死亡率等同于一次染毒组 计算K值 如果出现染毒期间累计剂量达到5个LD50，也终止实验 剂量递增法 开始时0.1LD50，每日喂饲，4天后按固定倍数增加剂量，直到动物与对照组出现相同情况，一般21天结束 t1/2法 利用机体内外源性物质的浓度更准确的判断物质的蓄积性 不同染毒方式的染毒曲线 外源性物质在体内的代谢吸收和代谢 一室模型和二室模型的曲线形式 一室模型的计算 举例： 4药物代谢学中的应用:如t(1/2),的计算,一室模型和二室模型,现举例 时间 血液中药物浓度 1 80.0 2 41.5 3 21.5 4 11.2 5 5.8 6 3.0 其计算公式为：C=C0e-kt 经过自然对数变换之后为: logC=logC0+(-kt) Kt=logC 0-logC 根据方程可以看出:K=0.656 C0=EXP(5.039) 那么;t(1/2)所对应的药物浓度为C0=EXP(5.039)/2 将上述结果带入方程就得出t(1/2) 优缺点 优点： 用血液中的物质的浓度代替人为的观察，数据更可靠， 每一个数据的节点都是通过公式计算而来，数据更具有准确性， 优缺点 缺点 需要测定血液中的物质的浓度，方法采取HPLC法，设备昂贵， 模型的拟合需要利用统计学软件，需要扎实的统计学知识， 对机能蓄积能力有限 亚慢性与慢性毒理实验 亚慢性3个月，慢性6个月，有些要求1年以上或2年 亚慢性实验的目的： 　　1．观察受试物以下同剂量水平较长期喂养对动物的毒性作用性质和靶器官，并确定最大无作用剂量。 　　2．了解受试物对动物繁殖及对子代的致畸作用。 　　3．为慢性毒性和致癌试验的剂量选择提供依据。 　　4．为评价受试物能否应用于食品提供依据。 试验项目： 　　1．90天喂养试验。 　　2．喂养繁殖试验。 　　3．喂养致畸试验。 　　4．传统致畸试验。 评价参数 阈值：出现某项症状时的最低染毒剂量。 最大耐受量 慢性毒作用带 亚慢性毒性实验程序 实验动物的选择：一般要求两种动物 常用大鼠：因为大鼠寿命为2.5年，小鼠为1.3年 狗或猫等哺乳动物 多为beagle犬 染毒条件 吸入时 6h/d*时间 皮肤同样 染毒方式 经口染毒：灌胃法，喂饲法和胶囊法 经呼吸道染毒 注射染毒： 特殊染毒方式 在染毒时，最好进行毒代动力学检测 剂量和分组 3个剂量组和一个阴性对照组 高剂量组要求：能引起动物毒反映但很少死亡 低剂量组无中毒现象发生 剂量组距为3—10倍 该实验的设计 研究某新开发药物的长期毒作用，请你设计一个合理的实验 1分组：3—5个 对照组 动物数：每组10个 观察指标：动态观察应该选大鼠 实验分组 要求设立3个染诉实验组 最高剂量组要求：急性毒性实验的阈剂量 或按照LD50的1/20—1/5 确定。 其他剂量按照2或3倍比稀释 最高剂量组动物可能会出现死亡，因此可以适当增加动物数量 染毒结束后继续观察4周左右 观察指标 动物体重的变化 食物利用率 症状 化学检验 脏器系数变化 病理学检查 其他指标 慢性实验 定义：是指实验动物或人长期（甚至终生）反复接触外源性化学物所产生的毒效应。长期一般是指2年 慢性实验目的 慢性毒性的剂量—效应关系 慢性毒效应谱，毒作用特点和毒作用靶器官 观察慢性毒作用的可逆性 研究毒作用机制和外推到人的可能性 慢性实验 动物的选择 染毒时间 剂量分组 观察指标 外源性化学物的基础毒理性与研究方法 外源性化学物的概念 有些对人体有益如：吃饭，喝茶等 有些对人体无作用：如糖精 有些对人体有害如：农药 外源性化学物对机体作用的研究方法以及优缺点 整体动物实验 一般的研究应用 离体器官研究 如蛙心灌流 细胞培养 短期快速实验，不招动物保护组织反对 毒理学评价程序 　　本程序包括四个阶段，即急性毒性试验，蓄积毒性和致突变试验，亚慢性毒性（包括繁殖、致畸）试验和代谢试验，慢性毒性（包括致癌）试验。 基础研究的分类 急性作用 蓄积作用 亚慢性作用 慢性作用 按微生物学控制原理分类 实验动物可分为 普通级 清洁级 SPF级（Specific Pathogen Free)无特定病原体的动物 无菌动物 普通级动物——未经严格控制微生物的动物，饲养在开放环境设施中。用于教育示教。不允许存在人畜共患病和严重的动物传染病。如沙门氏菌、出血热、弓形虫、螨、虱，猴疱疹病毒（B病毒），鼠痘病毒 清洁级动物—